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绪 论
一.微生物的概念及种类
1. 微生物 Microorganism(<0.1mm)
一切形体微小、结构简单、进化地位低的、用肉眼看不见其个体形态的微小生物的总称。
2. 种类
细菌、放线菌、蓝细菌、衣原体、枝原体、立克次氏体、真菌、单细胞显微藻类、原生动物、病毒。
二.Mic在生物六界分类系统中的地位
1、动物界(Animalia)
2、植物界(Viridiplantae)
3、真菌界(Fungi):霉菌、酵母菌、蕈子
4、原生生物界(Protozoa):原生动物、单细胞显微藻类
5、原核生物界(Monera):细菌、放线菌、蓝细菌、衣原体、枝原体、立克次氏体
6、病毒界(病毒、拟病毒、类病毒、朊病毒等)
另:三原界:将细胞生物分为古细菌原界、真细菌原界、真核生物原界。
1、古细菌原界——
a、产甲烷细菌:利用三碳以下化合物,严格厌氧。
b、极端嗜盐菌:氯化钠浓度大于9%才生长,12-25%最适。
c、极端嗜热菌:80度以上,火山,岩浆中。
d、无细胞壁的专性嗜酸菌:PH中性时细胞自溶,1-2最适。
真细菌原界——放线菌、蓝细菌、衣原体、枝原体、立克次氏体及大部分细菌。 真核生物原界:真菌界和原生生物界
三.Mic共同的特点
1. 体积小,表面积大
如园褐固N菌,2千万个一粒小米,大肠杆菌500个连接起来1mm。
2. 吸收多、转化快
500公斤牛,24小时可浓缩0.5公斤pr,同重酵母菌可合成5万公斤pr。
3. 生长旺,繁殖快
大肠杆菌,20分钟一代,一昼夜272=4.7×1013亿个,重约4722吨
4. 分布广、种类多
在人体肠道内有100—400种不同种类Mic,占人体粪便干重的1/3。
5. 适应强,易变异
青霉素 的应用
四.微生物与人类的关系
(一)有益的方面
1. 参与自然界的物质循环—分解者
2. 有些Mic可直接用作肥料
如根瘤菌肥:利用根瘤菌固N2作用,拌种。
肥力高:肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)。
3.生物农药(杀虫杀菌剂):
苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis) ;农用抗菌素→链霉素(灰色链霉菌)防蔬菜细菌性病害。【微生物ppt】
4. 食品工业应用:
醋酸菌→醋,曲霉—酱油,乳酸菌—酸奶,酵母菌酿酒,木耳、蘑菇
5. 医学方面:
抗菌素、疫苗、三株口服液(双歧菌杆、酵母菌、乳酸菌)【微生物ppt】
6. 能源:沼气发酵,利用甲烷细菌→产生甲烷
7. 畜牧业:青贮饲料(乳酸杆菌、酵母菌)。
(二)有害方面
1. 植物病害
2. 动物病害
3. 物品变质、霉烂
4.生物武器:炭疽杆菌引起各种炎症及败血症。
五.微生物研究的内容及目的
内容:1. 微生物种类、形态结构及其生物学特性
2. Mic营养生长及其代谢特点
3.Mic在物质循环中的作用
目的: “兴利除弊、趋利避害”
微生物学奠基人
1、列文虎克(Leeuwenhoek):1632-1723 荷兰
显微镜的发明,一生制作419台,放大率50-200倍。
2、路易·巴斯德(Louis pasteur): 1822-1895 法国
曲颈瓶(swan-necked flask)实验彻底否定了自然发生说同时证明空气中存在微生物。巴氏消毒法:62-63度处理15分,结核杆菌致死温度62度。
3、罗伯特·柯赫(Robert Koch) :1843-1910 德国
证实了病原菌学说—柯赫法则
第一章 原核微生物
原核细胞的特点:
1、细胞壁的主要成分—肽聚糖。(真核细胞--纤维素、几丁质)
2、细胞膜:由磷脂和Pr构成,内陷形成中间体。
3、细胞质:无细胞器,核糖体小70S。(真核-80 S)
4、细胞核:无核膜,有模糊的核区—1-4条双螺旋、环形DNA,无组蛋白。(真核—DNA与组蛋白结合、多条、线形、有明显核仁、核膜外突—内质网)。
5、其它:原核细胞较小(2um以下),没有有丝分裂,不进行有性生殖。
第一节:细 菌
一.概念及存在表现
1. 细菌:个体微小(0.5—5μm),结构简单,以二等分裂方式繁殖,水生性较强的单细胞Mic。
2. 表现:(1) 酸臭味 (2)固体上呈水珠状或酱糊状,水中为混浊、沉淀或飘浮物 (3)手感粘滑,易拉丝
二.形态
1.球形(菌):coccus
2.杆形(菌):bacillus
3.螺旋形(菌):spirilla 或螺旋体 spirochaete
4.特殊形态细菌:
三.细菌的染色
1、简单染色法:涂片—干燥—固定—燃料染色—水洗—干燥
2、革兰氏染色: 涂片—干燥—固定—结晶紫染色—碘液媒染—95%酒精脱色—番红复染—水洗—干燥—紫色的为阳性G+
红色的为阴性G-
四.细菌细胞基本构造
(一)、细胞壁:占细胞干重10%-20%,较硬。
1、功能:
(1)维持细胞形态
(2)保护细胞免受外力损伤
(3)与鞭毛运动有关
(4)阻拦大分子物质的出入
(5)维持细胞正常分裂。
2. 成份和构造:
G+:肽聚糖(85%左右)、磷壁酸(15%左右)、多数不含类脂质 ,个别有仅占2% ,壁厚,肽聚糖结构密
G-:肽聚糖(15%)、pr(65%)、类脂质(20%,主要脂多糖),分两层:外膜和薄肽聚糖层通过脂蛋白将其连接起来,壁薄,肽聚糖疏松。
肽聚糖:是由双糖和短肽连结而成三维立体结构。
1、双糖:N-乙酰葡萄糖胺(NAG)与N-乙酰胞壁酸(NAM)通过B-1、4糖苷键相连。
2、短肽:由不同种类氨基酸连接而成
阳性:金色葡萄球菌
L-丙氨酸(Ala)
D-谷氨酸(Glu)
L-赖氨酸(Lys)
D-丙氨酸(Ala)。
阴性:大肠杆菌
L-丙氨酸(Ala)
D-谷氨酸(Glu)
二氨基庚二酸(DAP)
D-丙氨酸(Ala)。
原生质体:人为酸消化处理肽聚糖后,阳性细菌细胞壁完全消失,只有细胞膜包围原生质。
原生质球:人为酸消化处理肽聚糖后,阴性细菌细胞壁肽聚糖层消失,有细胞膜和细胞壁外膜共同包围原生质。
缺壁细胞
L型细菌:实验室条件下自发突变而形成的遗传性稳定无细胞壁的菌株,由英国李斯德发现。【微生物ppt】
支原体:自然界长期进化过程中形成缺壁细菌。
原生质体:阳性细菌
原生质球:阴性细菌
(二)细胞膜:双层磷脂(20-30%)和pr(60-70%)及少量糖类。在电镜下观
察,厚7—8nm。
功能:1. 控制cell内外物质的运输(吸收营养)。
2.内折形成中间体,参与细胞代谢。
3.是鞭毛着生处,与细菌运动有关
4.是DNA附着位点,与细胞分裂有关。
在电镜下观察可见一个或数个较大的不规则的由细胞质膜内陷而成的层状、管状或囊状物,称为中间体,在革兰氏阳性菌中尤为明显。
(三)细胞质(cytoplasm)
无机物:无机盐、水。
有机物:糖、pr、氨基酸、类脂。占干重99%,大肠杆菌细 胞内有5000多种不同的有机分子。无细胞器,有核糖体70S。
内含物:
淀粉粒:碘染呈蓝色
肝糖粒:碘染红褐色
聚β羟基丁酸:苏丹黑染黑色,用于手术针及线
异染粒:美兰染成红色,多聚磷酸盐
磁细菌能合成磁铁晶体,紫色硫细菌可形成硫滴。
质粒(plosmid):分散在细菌细胞质中游离于染色体外能独立进行复制的小型环状DNA分子。分子量为核基因的1/100;非必要遗传物质,决定菌体的次要性状;具有重组性和转移性。
基因工程:人为将目的基因DNA提取出来,用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA(质粒、病毒)连接起来,然后倒入某一更易生长繁殖的受体细胞(微生物、植物、动物)中,以让外源目的基因在其中进行正常的复制和表达,从而获得新的物种。
最有代表性的几种细菌质粒
1、诱癌质粒即Ti质粒: (tumor inducing plasmid)
根癌脓杆菌:Agrobaterium tumefaciens
质粒基因-细胞分裂素
2.毒素质粒
苏云金杆菌(青虫菌):Bacillus thuringiensis
质粒基因-伴胞晶体蛋白:在微碱环境中变为毒性蛋白。
大肠杆菌:Escherichia coli
Col 因子(colicinogenic factor) 即产生大肠杆菌毒素因子,杀死其它原核微生物。
3.巨大质粒-固氮质粒
根瘤菌属 Rhizobium 细菌中发现,其质粒分子量比一般质粒大几十至几百倍。
4.降解性质粒
假单胞菌属 Pseudomonas 质粒基因决定特殊酶的合成。樟脑质粒、辛烷质粒、二甲苯质粒、奈质粒、烃质粒等。
5.R质粒 (resistance)即抗药性质粒
沙门氏菌属 Salmonella
芽孢杆菌属 Bacillus
葡萄球菌属 Staphylococcus
(四)原核(nucloia)
无核膜,絮状核区有一到四条双螺旋状DNA链,不含组蛋白,是遗传物质,决定主
五.细菌细胞的特殊构
1. 鞭毛:(flagellum)着生于细胞膜上,穿过细胞壁伸出体外的弯曲,波状细管状物,长度15—70μm,直径12—25nm,是细菌的运动器官,易脱落,主要成份是pr。分三部分:基体、钩形鞘和螺旋丝。
(1)单生鞭毛:霍乱弧菌。
(2)丛生鞭毛:红色螺菌。
(3)周生鞭毛:大肠杆菌,枯草杆菌。
2. 菌毛(Pilus):多,细、短、硬,主要成份pr。
功能:粘附作用。
3. 芽胞(endospore):某些细菌发育到后期,由于条件不适宜,细胞内原生质浓缩而形成圆形或椭圆形的抗逆性的休眠孢子。
功能:抗逆-吡啶二羧酸钙
特点:折光性强,抗逆性强
如肉毒梭菌营养体100度10分钟杀死,芽胞100度需5——10小时。该菌可产生外毒素,毒性是氰化钾1万倍,对人致死量10-9 mg/kg体重,进入血液麻痹中枢神经,导致死亡 。
枯草杆菌干燥条件下存活200—300年。
炭疽芽孢杆菌
4. 荚膜:(capsule)是菌体分泌的包在菌体外面的具有一定形状和厚度的胶状物; 成份:90%以上水分,少量多糖,果胶,多肽、pr;
菌胶团:许多菌体被一个共同的荚膜所包围,圆褐固氮菌
功能 :
(1)保护菌体免受干旱,利用其中水份进行代谢。
(2)是体外营养贮存库,代谢物堆积处。
(3)粘附于其它物体表面,唾液链球菌→龋齿。
(4)与致病性有关,如肺炎球菌,产荚膜—致病;
(5)工业:提取黄杆胶-黄单胞菌,润滑剂。
(6)医学:提取葡聚糖作为代血浆-明串珠菌 。
六.细菌的繁殖
1. 方式:裂殖
2. 菌落(colony):
一个或几个同种的Mic按种于平板固体培养基表面或内部,经生长繁殖形成肉眼可见的以母细胞为中心的具一定形状、结构的子细胞群体。
3.菌落特征:(1)较小 (2)粘稠湿润 (3)透明或半透明 (4)易挑取(5) 颜色、质地均一。
七.细菌的分类
1. 命名:瑞典—林奈1753年提出的双命名法,如枯草芽胞杆菌:Bacillus subtilis Cohn;如有亚种种名后加subsp(亚种名)或var(变种名)三名法,如莹光假单胞菌纤维素亚种:Pseuolononas fluorescens subsp. cellulosae.
2. 分类依据(经典常规法)
(1)个体形态结构及其染色反应:
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