【www.guakaob.com--报告】
生物技术实践
一、选择题(每小题5分,共20分)
1.在家庭中用鲜葡萄制作果酒时,正确的操作是( )
A.将葡萄进行消毒,杀死其表面的微生物
B.给发酵装置适时排气
C.向发酵装置通入空气
D.给发酵装置提供30 ℃以上高温
解析:家庭用葡萄制作果酒时,其菌种就是用的葡萄表面的天然酵母菌,所以不能消毒,只冲洗就可以了。酵母菌发酵产生CO2,故应适时排气,酵母菌无氧发酵能产生酒精,所以不能通入空气。酵母菌发酵的适宜温度是18~25 ℃,所以不能提供30 ℃以上高温。
答案:B
2.下列与果酒、果醋和腐乳制作相关的叙述,正确的是( )
A.腐乳制作所需要的适宜温度最高
B.果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C.使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D.使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA
解析:果醋制作中所需温度最高,为30~35 ℃。制果醋所用的醋酸菌是好氧菌,只能进行有氧发酵。腐乳制作所用菌种是霉菌。细菌与真菌都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA。
答案:
D
3.(2012·广东六校联合体5月模拟)若利用如图所示的装置直接制作果醋,将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置后,下列做法合理的是( )
A.加入适量的酵母菌
B.一直打开阀a和阀b通气
C.一直关紧阀a,偶尔打开阀b几秒钟
D.把发酵装置放到15 ℃的恒温箱中进行发酵
解析:果醋制作的菌种是醋酸杆菌,A项错误;醋酸杆菌发酵要求有氧环境,应一直打开阀a、b通气,B项正确、C项错误;发酵温度为30~35 ℃,D项错误。
答案:B
4.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是( )
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48 h
D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
解析:检测土壤中细菌总数,用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板,取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上,将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48 h,在确定对照组无菌后,应选择菌落数在30~300的一组平板为代表进行计数。
答案:D
二、非选择题(共80分)
5.(2012·辽宁抚顺模拟)(10分)酵母菌是一种真菌,与人们的日常生活密切相关,也是现代技术
研究常用的模式生物,请回答下列问题。
(1)土壤中富含各种微生物,将其浸出液接种到特定培养基上,可得到酵母菌,这一过程叫
做 ,这种特定培养基可称为 。
(2)用酵母菌发面做馒头时,在发酵的面团里加入一些纯碱的主要作用是 。
(3)制作果酒时,将酵母菌加入到葡萄汁中,控制好发酵条件,10 d后得到散发着酒香的成品,此
过程的原理是
。
(4)苹果醋也是受现代人所青睐的健康饮品之一,其生产过程中则利用了代谢类型为 的 的发酵作用,该过程需要控制的温度条件是 。
解析:土壤浸出液接种到特定培养基上,可得到酵母菌,这属于酵母菌的分离,所用的特定培养
基为选择培养基。用酵母菌发面做馒头时,酵母菌呼吸作用产生二氧化碳,二氧化碳溶于水形
成碳酸,发酵的面团里加入一些纯碱可中和碳酸。酵母菌酿酒是利用酵母菌无氧呼吸能产生
酒精。果醋是醋酸菌的发酵产物,发酵温度为30~35 ℃,醋酸菌的代谢类型为异养需氧型。
答案:(1)酵母菌的分离 选择培养基
(2)中和发酵时产生的酸类物质
(3)在无氧条件下,酵母菌进行酒精发酵
(4)异养需氧型 醋酸菌 30~35 ℃
6.(20分)根据下列材料回答相关问题。
Ⅰ.从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测
定。回答下列问题。
(1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再
按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从 环境采集。
(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其在群落中的数量大大
增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择 的培养基,并在 条件下培养。
(3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解,请分析接种的具
体方法。
获得图A效果的接种方法是 ,获得图B效果的接种方法是 。
(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行 ,接种前要进行 ,
在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在 条件下进行。
Ⅱ.生物组织中有机物的提取方法有很多种。例如,蒸馏法、压榨法和萃取法等,不同的有机物
提取的方法各有不同。
(1)玫瑰精油称为“液体黄金”,是世界香料工业不可取代的原料,提取出的玫瑰精油要求不含
有任何添加剂或化学原料,其提取方法主要
是 。
(2)杏仁油富含矿物质和维生素,是一种质地轻柔、高渗透性的保湿剂,主要通过 提取。
(3)萃取胡萝卜素前,要将胡萝卜彻底粉碎的主要目的是
解析:Ⅰ.(1)根据生物对环境的适应性,培养嗜盐菌的菌样应从海滩等高盐环境采集。(2)根据要求,对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择以淀粉为唯一碳源的培养基,并在高温条件下培养。(3)由图可知,A是稀释涂布平板法,B是平板划线法。(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须先调整pH,再高压蒸汽灭菌;在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在灭菌条件进行。Ⅱ.提取玫瑰精油的方法主要是水蒸气蒸馏法;杏仁油主要通过压榨法提取;提取胡萝卜素时,为了使原料颗粒变小,提高萃取效率,要将胡萝卜彻底粉碎。
答案:Ⅰ.(1)海滩等高盐 (2)以淀粉为唯一碳源 高温
(3)稀释涂布平板法 平板划线法 (4)pH调整 高压蒸汽灭菌 无菌
Ⅱ.(1)水蒸气蒸馏法 (2)压榨 (3)使原料颗粒变小,提高萃取效率
7.(14分)人参是一种名贵中药材,其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下
:
请回答下列问题。
(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基,分装后要进行 。接种前,要对人参根进行 。
(2)用于离体培养的根切块,叫做 。培养几天后发现少数培养基被污染,若是有颜色的绒毛状菌落,属于 污染;若是有光泽的黏液状菌落,属于 污染。
(3)用少量 ,获取单细胞或小细胞团,在液体培养基中进行悬浮培养,可有效提高人参皂苷合成量。
(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶剂,从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用 方法,操作时应采用 加热。
解析:(1)进行植物组织培养时,培养基要灭菌,培养物要消毒。(2)植物组织培养时,培养物称为外植体。若发生污染,绒毛状菌落为真菌,黏液状菌落为细菌。(3)利用果胶酶处理植物组织可得到单细胞或小细胞团。(4)人参皂苷易溶于水溶性有机溶剂,可用萃取方法提取,为避免高温加热使人参皂苷变性可用水浴加热。
答案:(1)灭菌 消毒 (2)外植体 真菌(霉菌) 细菌 (3)果胶 (4)萃取(浸取) 水浴
8.(2012·江苏苏中三市二模)(16分)目前大多数厂家采用的低盐固态发酵工艺生产的酱油与传统酿造相比,酱香不足,风味较差。固定化产酯酵母可以利用酱油中的部分糖产生酒精和乙酸乙酯等呈味物质,提高了低盐固态工艺酱油的品质。下面是科研人员的实验过程和结果:
实验步骤:
①将冰箱中4 ℃保存的菌种接种在麦芽汁培养基中,30 ℃恒温培养3 d。
②称取一定量的海藻酸钠加入水中,加热溶化,配成质量分数为3%的海藻酸钠溶液。
③将溶化好的海藻酸钠溶液放置一段时间后,加入产酯酵母,进行充分搅拌,混合均匀。
④用10 mL的针筒吸取混合液滴于质量分数为4%的氯化钙溶液中,形成凝胶珠。待凝胶珠在氯化钙溶液中浸泡30 min后取出,用蒸馏水冲洗3次,备用。
⑤配制不同葡萄糖添加量的酱油,分别加入等量的固定化产酯酵母,在适宜条件下发酵一段时间后,测定酱油中酒精和乙酸乙酯的含量。
实验结果:
(1)步骤①的目的是 。
(2)步骤③中需将溶化好的海藻酸钠溶液放置一段时间,其目的
是 。凝胶珠从氯化钙溶液中取出后,用蒸馏水冲洗掉凝胶珠
表面的氯化钙溶液,防止 。
(3)该实验结果表明 。
(4)在传统酱油生产过程中,需向发酵液中添加一定量的食盐。若添加量过低,会 若添加量过高,
会
。
(5)若要探究固定化产酯酵母和游离产酯酵母产生酒精和乙酸乙酯能力的差异,你的实验设计
思路是:
。
解析:菌种接种在麦芽汁培养基中,30 ℃恒温培养3 d的目的是使酵母菌活化和增殖。海藻酸
钠加入水中,加热溶化,要求小火加热,溶化好的海藻酸钠溶液放置一段时间,其目的是冷却至
常温,防止高温杀死酵母菌。凝胶珠从氯化钙溶液中取出后,用蒸馏水冲洗掉凝胶珠表面的氯
化钙溶液,防止凝胶珠硬度过大,影响通透性。酱油生产过程中,需向发酵液中添加一定量的食
盐,若添加量过低,会造成杂菌污染,若添加量过高,会抑制酱油生产所需微生物的代谢。
答案:(1)使酵母菌活化和增殖 小火加热(或间断加热)
(2)冷却至常温,防止高温杀死酵母菌 凝胶珠硬度过大,影响通透性
(3)添加葡萄糖能促进酒精和乙酸乙酯的生成(或酱油中2%的葡萄糖添加量最有利于酒
精和乙酸乙酯的生成)
(4)造成杂菌污染 抑制酱油生产所需微生物的代谢(或影响酱油口味)
(5)在酱油中分别加入数量相等的固定化产酯酵母和游离产酯酵母,其他条件保持适宜且
相同。一段时间后测定酱油中酒精和乙酸乙酯的含量
9.(2012·山东潍坊二模)(10分)酶已广泛地应用在食品、化工、轻纺、医药等领域。在应用酶
的过程中,常遇到酶很难回收再利用等实际问题。固定在载体上的酶可以被反复利用。自20
世纪70年代,在固定化酶技术的基础上,又发展出了细胞固定化技术。请回答下列问题。
(1)一般来说,酶更适合采用的固定化技术有 和 ,而细胞多采用的固定
化技术是 。
(2)称取干酵母,放入内有蒸馏水的小烧杯中搅拌至混合均匀,并放置1小时左右。其目的
是 。
(3)配制海藻酸钠溶液时,在用酒精灯加热时,注意要 ,反复几次。
(4)将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至 ,加入已活化的酵母细胞,充分搅拌至混合均
匀。
(5)将装有酵母细胞与海藻酸钠溶液混合物的注射器,以恒定的速度滴加到配好的 溶液中,形成 ,完成对酵母细胞的固定化。
答案:(1)化学结合法 物理吸附法 包埋法
(2)使酵母细胞活化
(3)用小火或间断加热
(4)室温
(5)CaCl2 凝胶珠
10.(2012·广州测试)(10分)下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径,请据图回答有关问题。
(1)选用的材料合适与否是能否成功诱导出花粉植株的重要因素,一般来说选用 的花粉可提高成功率。选择花粉时,一般要通过 来确定花粉是否处于合适的发育期,这时需要对花粉的细胞核进行染色,常用的染色剂是 。
(2)上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中
(3)胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则,是一种高度 的薄壁细胞,胚状体与 发育形成的胚有类似的结构,即具有胚芽、胚轴和胚根。
(4)无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素,请说明下列各项需要消毒,还是需要灭菌。①培养基,②培养皿,③接种环,④花蕾,⑤实验操作者的双手,⑥三角锥形瓶。 (填编号)需要灭菌, (填编号)需要消毒。
(5)试管苗移栽到土壤前,通常要进行壮苗处理,应如何壮苗?
。
解析:(1)单核期花粉对离体刺激敏感,选用该期花粉可提高培养的成功率;选择花粉时可用显微镜观察、筛选;对花粉细胞核染色应选择碱性染料,常用醋酸洋红。(2)细胞培养成植株的两条途径取决于植物激素的种类及比例,尤其是生长素和细胞分裂素。(3)愈伤组织细胞的特点为细胞排列疏松无规则、高度液泡化;胚状体是具有与胚相似的根或芽的结构。(4)灭菌对象为培养基和实验器材,消毒对象为要保持活性的材料和实验者自身。(5)壮苗是使试管苗逐步适应外界环境的做法。
答案:(1)单核 镜检(显微镜观察) 醋酸洋红
(2)激素的种类及其浓度配比
(3)液泡化 正常受精卵(或受精卵)
(4)①②③⑥ ④⑤
(5)将试管苗移栽到经消毒过的培养基中生活一段时间,等幼苗长壮后再移栽到土壤
中 。
(4)苹果醋也是受现代人所青睐的健康饮品之一,其生产过程中则利用了代谢类型为 的 的发酵作用,该过程需要控制的温度条件是 。
解析:土壤浸出液接种到特定培养基上,可得到酵母菌,这属于酵母菌的分离,所用的特定培养基为选择培养基。用酵母菌发面做馒头时,酵母菌呼吸作用产生二氧化碳,二氧化碳溶于水形成碳酸,发酵的面团里加入一些纯碱可中和碳酸。酵母菌酿酒是利用酵母菌无氧呼吸能产生酒精。果醋是醋酸菌的发酵产物,发酵温度为30~35 ℃,醋酸菌的代谢类型为异养需氧型。 答案:(1)酵母菌的分离 选择培养基
(2)中和发酵时产生的酸类物质
(3)在无氧条件下,酵母菌进行酒精发酵
(4)异养需氧型 醋酸菌 30~35 ℃
选修1《生物技术实践》专题1～专题3
一、选择题（每小题只有1个选项符合题意，每小题2分，共40分）
1．下列关于醋酸菌的叙述，正确的是 （ ） A．醋酸菌为严格有氧呼吸 B．醋酸菌有氧无氧都能生存 C．醋酸菌能形成芽孢 D．醋酸菌能将淀粉分解成醋酸 2．下列关于果酒制作过程中的叙述，正确的是 （ ） A．应先除去葡萄的枝梗，再进行冲洗，这样洗得彻底 B．使发酵装置的温度维持在20℃左右最好 C．在发酵过程中，需从充气口不断通入空气
D．由于酵母菌的繁殖能力很强，不需对所用装置进行消毒处理 3．腐乳味道鲜美，易于消化、吸收，是因为其内主要含有的营养成分有 （ ） A．无机盐、水、维生素 B．NaCl、水、蛋白质 C．多肽、氨基酸、甘油和脂肪酸 D．蛋白质、脂肪、NaCl、水、 4．腐乳在酿造后期发酵中添加适量酒液的目的不包括 （ ） A．防腐 B．与有机酸结合形成酯 C．利于后期发酵 D．满足饮酒的需要
5．在制作泡菜的过程中，不正确的是 （ ） A．按照清水与盐的质量比为4∶1的比例配制盐水 B．按照清水与盐的质量比为5∶1的比例配制盐水 C．盐水入坛前要煮沸冷却，以防污染
D．在坛盖边沿的水槽中要注满水，以保证坛内的无氧环境
6．关于亚硝酸盐含量测定原理的正确描述是 （ ） A．重氮化→酸化→显色→比色 B．重氮化→酸化→比色→显色 C．酸化→重氮化→显色→比色 D．酸化→重氮化→比色→显色 7．制作泡菜的过程中亚硝酸盐的含量变化 （ ） A．先减少后增加 B．先增加后减少 C．逐渐增加 D．逐渐减少 8．下列叙述错误的是 （ ） A．培养乳酸菌时需要在培养基中添加维生素 B．培养霉菌时需将培养基的pH调至碱性
C．培养细菌时需将培养基的pH调至中性或微碱性 D．培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件
9．牛肉膏可以为微生物提供 （ ） A．氮源和维生素 B．氢元素氧元素 C．碳源、磷酸盐和维生素 D．无机盐
10．有关稀释涂布平板法，叙述错误的是 （ ）
A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释
B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 C．其核心是防止杂菌污染，保证培养液的纯度 D．结果都是可在培养基表面形成单个的菌落
11．下列不属于菌落特征的是 （ ） A．菌落的形状 B．有无荚膜 C．菌落的大小 D．隆起程度 12．关于选择培养正确的是 （ ）
A．可以增加纤维素分解菌的浓度 B．可以减少纤维素分解菌的浓度
C．所用培养基是固体培养基 D．选择培养不可以省略，但可以重复操作 13．能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是 （ ）
A．CO2和N2 B．葡萄糖和NH3 C．CO2和尿素 D．葡萄糖和尿素 14．下列不属于纤维素酶组分的是 （ ）
A．C1酶 B．Cx酶 C．葡萄糖苷酶 D．半乳糖苷酶
15．以下不能说明细胞全能性的实验是 （ ）
A．胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 B．紫色糯性玉米种子培育出植株
C．转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 D．番茄与马铃薯体细胞杂交后培育出植株 16．植物细胞表现出全能性的条件是 （ ） A．给予适宜的营养和外界条件 B．将成熟筛管的细胞核移植到去核卵细胞中 C．导入其他植物细胞的基因 D．脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件
17．运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种，操作过程中不能形成愈伤组织的是（ ）
A．植物组织培养 B．植物体细胞杂交 C．动物细胞培养 D．转基因植物的培育
18．愈伤组织分化过程中，培养基中细胞分裂素/生长素的比值较低时诱导分化的是（ ） A．根 B．芽 C．叶 D．胚性细胞团 19．科学家将月季花的花药进行培养，获得了许多完整幼小植株，下列说法正确的是（ ）
A．彼此性状极相似 C．属于有性繁殖 A．生产人工种子 B．生产新品种 二、非选择题（共60分）
21．（10分）腐乳是我国民间传统发酵食品，营养丰富，味道鲜美。请回答有关问题：
（1）腐乳制作中，起主要作用的生物是_______________，它与乳酸菌在结构上的主要区别是
_________________________________________。
（2）有腐乳制作中，加盐的目的是（写三个）：___________________________________、
_______________________________________、_____________________________。
（3）卤汤中酒的含量为何要控制在12％左右？___________________________________
______________________________________________________________________。
（4）豆腐乳的品种很多，说明红方腐乳、糟方腐乳和青方腐乳在辅料上的区别：______
______________________________________________________________________。
22．（10分）如下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图回答：
（1）制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是____________________________。
（2）制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约为___________，盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是
___________________________________________________________。
（3）泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，试分析可能的原因：
______________________________________________________________________。 （4）测定亚硝酸盐含量的方法是___________________。 23．（10分）制备培养基方法：将蛋白胨、NaCl和牛肉膏放入烧杯内，加200mL蒸馏水，用玻璃棒搅匀后，在酒精灯
上加热。当蛋白胨、牛肉膏融化后，加入琼脂，用微火继续加热至琼脂溶化，补充水至200mL。用0.1mol/L的NaOH或0.1mol/L的HCl将pH调至7.0～7.2，分别对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌。当培养基的温度下降到50℃时，将其分装在5套培养皿中，当培养基冷却至室温，按下表分别进行处理。将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养2～3天，观察每个培养基中的细菌生长情况。请回答下列问题：
B．变异频率极高 D．都是纯合体
（ ）
C．生产杀虫剂
D．生产抗体
20．下列植物组织培养的目的中不正确的是
（1）该培养基中，含有的营养物质有_______________________。
（2）从培养基的物理性质来看，上述培养基是__________培养基，该种培养基主要用于微生物的
______________________等。
（3）实验中，有三处特别强调温度控制，请简要说明其控制温度的科学道理。 ①“高压蒸汽灭菌后培养基的温度下降到50℃”______________________________。 ②“当培养基冷却至室温，按下表分别进行处理”____________________________。 ③“将处理完毕的培养基置于35℃的温度下培养”___________________________。 24．（10分）在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，出现如下问题，请给予解答：
（1）一位同学用稀释倍数为106的稀释液在培养基中涂布了3个平板，统计的菌数数为21、212和256，该同学以
这3个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。你认为这一结果是否接近真实值？如果需要改进，如何改进_。
（2）A同学筛选出的菌落为150个，其他同学只选择出50个，并且他在设计实验时并没有设置对照。你认为A同
学照
结实
验果
排
产除
生可
的能
影原
响
因实
可验
能结
有果【生物技术实践专题试题】
的
哪因
些素
？：
___________________________________________________________________________________。如何设计对______________________________________________________________________________________________ _____。
25．（10分）将基因型为AaBb的小麦的花粉细胞通过无菌操作接入含有全部营养成分的培养基的试管中，在一定条件
下诱导形成试管幼苗，其过程如下图：
小麦的花粉细胞①—→愈伤组织②—→丛芽③—→植株
（1）发育成的植株④称为_____________，基因型有_____________________________。
（2）小麦形成花粉的细胞分裂方式是_____________，花粉发育成植物体的过程中细胞分裂方式是
________________。
（3）若得到可育的植株，需要用____________对_________（填符号）进行处理，所获得的基因型可能是
_______________________________________。
（4）①→②过程需要的条件有________。（A．营养 B．激素 C．光照 D．pH） 26．（10分）请回答下列有关月季花药培养过程中的有关问题：
（1）配制培养基时加琼脂的目的是___________________________________________。 （2）组织培养要求无菌操作的目的是_________________________________________。 （3）在愈伤组织形成过程中必须从培养基中获得的营养物质有___________________ _______________________________等。
（4）愈伤组织分化成根和芽，再由芽发育成叶和茎，这一过程称为____________，此过程需要光照，原因是
_________________________________________________。【生物技术实践专题试题】
？
答案卷
二、非选择题（共60分） 21．（10分）
（1）_______________， _________________________________________。 （
2
）
_______________________________
、
_______________________________________
、
_____________________________。
（3）______________________________________________________________________ 。
（4）_______________________________________________________________________。 22．（10分）
（1）____________________________。
（2）___________，________________________________________________________。 （3）______________________________________________________________________。 （4）___________________。 23．（10分） （1）_______________________。 （2）__________， ______________________。 （3）①______________________________。②____________________________。 ③__________________________。 24．（10分）
（1）_。 （
2
）
______________________________________________________________________
。
___________________________________________________________________________________________________。
25．（10分）
（1）_____________， ________________。（2）_____________， ________________。 （3）____________对_________ _______________________________________。 （4）________。（A．营养 B．激素 C．光照 D．pH） 26．
（1）___________________________________________。 （2）_________________________________________。
（3）__________________________________________________。
（4）____________， _________________________________________________。
参考答案
1．A 2．B 3．C 4．D 5．B 6．C 7．B 8．B
9．C 10．D 11．B 12．A 13．D 14．D 15．B 16．D
17．C 18．A 19．C 20．D 21．（1）毛霉（1分）；毛霉有成形的细胞核（1分） （2）抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质（1分）；加盐析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期制作过程
中不会过早酥烂（1分）；有调味作用（1分）
（3）酒精含量过高，腐乳成熟的时间将会延长，酒精含量过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败（2
分）
（4）红方腐乳加入红曲、糟方腐乳加入酒糟、青方腐乳不加辅料（3分） 22．（1）亚硝酸盐的含量低（2分） （2）4：1（2分）；加热煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响（2
分）
（3）泡菜坛子密封不严或取食工具不卫生，或盐的比例过小，都会引起杂菌滋生、泡菜变质（2分） （4）比色法（2分） 23．（1）碳源、氮源、生长因子、水分、无机盐（2分） （2）固体（1分）；分离和计数（1分）
（3）①防止培养基的温度过高使培养皿因受热不均而破裂（2分）
②防止培养基温度过高杀死接种在其上的细菌（或微生物）（2分） ③让细菌在适宜的温度下快速生长繁殖（2分）
24．（1）不接近真实值，接种前将菌液摇匀后重新实验（3分） （2）可能是土样不同，也可能是培养基污染或操作失误；（3分）
方案有二：一是由其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果与A同学一致，则证明无误，如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养基配制有问题。另一种方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。（4分）
25．（1）单倍体（1分）；AB、Ab、aB、ab（1分） （2）减数分裂（1分）；有丝分裂（1分） （3）秋水仙素（1分）；③（1分）；AABB、AAbb、aaBB、aabb（2分） （4）ABD（2分） 26．（1）使培养基呈固体状态，有利于离体植物细胞的培养（2分）
（2）避免微生物在培养基上快速繁殖，与离体培养的植物组织发生竞争关系（2分） （3）水、无机盐、维生素、小分子有机物（2分） （4）再分化（2分）；光照利于愈伤组织的分化，长出幼叶后也要进行光合作用（2分）
石阡民族中学2015届高二生物期中测试题
（命题人：黄利）
(考试时间：90分钟，满分：100分。)
班级：姓名：得分：
一、选择题（共20个小题，每题2分，共40分）
1．如下图所示，在适宜的温度条件下，在下列装置中都放入干酵母(内有活酵母菌)，其中适于产生酒精的装置是( )
2．下列关于腐乳制作的叙述，错误的是 ( )
A．含水量大于85%的豆腐利于保持湿度，适宜制作腐乳
B．在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与
C．卤汤中的酒应控制在12%左右
D．装瓶时，应将瓶口通过酒精灯火焰
3．在果酒、果醋和腐乳制作中，都要防止微生物污染，有关叙述正确的是 ( )
A．果醋发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌进入
B．腌制腐乳的卤汤中应含有12%左右的酒精以抑制细菌的增殖
C．利用自然菌种发酵果酒时，将封有葡萄汁的发酵瓶进行高压灭菌
D．将长满毛霉的豆腐放在瓶中，并逐层加盐，接近瓶口部分的盐要铺薄一些
4．稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是 ( )
A．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释
B．需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面
C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理
5．下表有关“DNA的粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂，不正确的是
( )
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6．发酵工程的第一个重要工作是选择优良的单一纯种。消灭杂菌，获得纯种的方法不包括（ ）
A．根据微生物对碳源需要的差别，使用含不同碳源的培养基
B．根据微生物缺乏生长因子的种类，在培养基中增减不同的生长因子
C．根据微生物遗传组成的差异，在培养基中加入不同比例的核酸
D．根据微生物对抗菌素敏感性的差异，在培养基中加入不同的抗菌素
7．通常用来作为菌种鉴定的重要依据是（ ）
A．菌落
B．细菌形态
C．细菌体积
D．细菌结构
8．细菌抗药性基因存在于（ ）
A．核区的DNA
B．RNA
C．质粒
D．小的直线型DNA
9．植物组织培养的过程可以归纳为：①
有错误的是（ ）
A．②→③的再分化过程中，细胞增殖的方式为有丝分裂
B．植物组织培养依据的原理是细胞的全能性
C．③→④过程指植物的营养生长和生殖生长阶段
D．将①经脱分化培养成②时，再植上人造种皮可获得人工种子 ②③④，对此叙述
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10．要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用（ ）
A．加入青霉素的培养基
B．加入高浓度食盐的培养基
C．固体培养基
D．液体培养基
11．将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（ ）
A．具有完整细胞核的细胞
B．一定的营养物质和植物激素
C．离体状态
D．导入指定基因
12．下列关于平菇培养的操作程序，正确的是（ ）
A．配制牛肉膏蛋白胨培养基，接种，高压蒸气灭菌，培养
B．配制牛肉膏蛋白胨培养基，高压蒸气灭苗，接种，培养
C．配制棉予壳培养基，接种，高压蒸气灭菌，培养
D．配制棉子壳培养基，高压蒸气灭菌，接种，培养
13.将配制好的培养基进行灭菌应采用( )
A．灼烧灭菌 B．高压蒸汽灭菌
C．干热灭菌 D．煮沸灭菌
14.下列关于微生物分离和培养的有关叙述，错误的是( )
A．微生物培养前，需对培养基进行消毒
B．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法
C．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度
D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源
15.在果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作过程中，用到的微生物分别是(
A．酵母菌、酵母菌、毛霉、乳酸菌
B．酵母菌、醋酸菌、毛霉、乳酸菌【生物技术实践专题试题】
C．毛霉、醋酸菌、乳酸菌、酵母菌
D．酵母菌、乳酸菌、毛霉、醋酸菌
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)
16.发酵工程的一项关键措施是灭菌，关于灭菌的叙述正确的是( )
A．培养基和发酵设备均需要严格灭菌
B．灭菌是杀死培养基中的一切细菌和真菌
C．通入无菌空气可以达到灭菌的目的
D．pH调到7左右灭菌效果最好
17.探究温度对果胶酶活性的影响、pH对酶活性的影响、果胶酶的用量三个实验中，实验变量依次为( )
A．温度、酶活性、酶用量
B．苹果泥用量、pH、果汁量
C．反应时间、酶活性、酶用量
D．温度、pH、果胶酶用量
18.如图甲是果醋发酵装置，乙是发酵过程中培养液pH变化曲线图，下列叙述正确的是( )
A．发酵初期不透气，溶液中没有气泡产生
B．中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵
C．后期接种醋酸菌，适当通气并保持原有温度
D．图乙中能正确表示pH变化的曲线是③
19.为探究落叶是否在土壤微生物的作用下腐烂，下列各项构成了一个实验设计，其中不符合实验目的的步骤是( )
A．可选择带有落叶的土壤为实验材料，筛选出落叶和土壤
B．将落叶平均分成两份，把土壤也平均分成两份
C．将灭菌的落叶设为实验组，不做处理的落叶设为对照组
D．将落叶分别埋入两组土壤中，观察腐烂情况
20.下列关于果酒和果醋制作的叙述，不正确的是( )
A．参与发酵的微生物都含有线粒体
B．发酵过程中培养液pH都会下降
C．制果酒时瓶口需密封，而制果醋时需要通入氧气
D．果酒制成后可将装置移至温度略高的环境中制果醋
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二、非选择题（每小题15分，共60分）
21.有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以 为唯
一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于 培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即 和 。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说
明该菌株的降解能力 。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、 和 。无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
22.下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：
（1）玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有 的性质。蒸馏时收集的蒸馏液 (是、不是)纯的玫瑰精油，原因是 。
（2）当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和 。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势： 。
（3）如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会 ，原因是 。
（4）密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度 的地方，目的
是 。
（5）某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为 天左右。
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《选修1：生物技术实践》历年真题汇编
2014年
（2014新课标1）39. 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将 分解成 。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成 色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的 。
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：
注：“+”表示有，“－”表示无。
据表判断，培养基甲 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；培养基乙 （填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是 ；
【答案】（1）纤维二糖 葡萄糖 （2）红色 透明圈
（3）不能 液体培养基不能分离单菌落 不能 乙培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
（2014新课标2）39．为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流学科网水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是 ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为 。
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过 灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是 。
（3）示意图A和B中， 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液的 的含量，同时可以学科网使菌体与培养液充分接触，提高 的利用率。
7【答案】（1）检测培养基平板灭菌是否合格 3.8×10
（2）灼烧 将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
（3）B （4）溶解氧 营养物质
（2014山东）35.（12分）玉米是重要的粮食作物，经深加工可生产酒精、玉米胚芽油和果
糖等。流程如下：
（1）玉米秸秆中的纤维素经充分水解后的产物可被酵母菌利用发酵生产酒精。培养酵母菌时，该水解产物为酵母菌的生长提供________。发酵过程中检测酵母菌数量可采用_______法或稀释涂布平板法计数。
（2）玉米胚芽油不易挥发，宜选用_______法或________法从玉米胚芽中提取。
（3）玉米淀粉经酶解形成的葡萄糖可在葡萄糖异构酶的作用下转化成果糖。利用________技术可使葡萄糖异构酶重复利用，从而降低生产成本。
（4）利用PCR技术扩增葡萄糖异构酶基因时，需用耐高温的_______催化。PCR一般要经历三十次以上的循环，每次循环包括变性、_______和_______三步。
【答案】（1）碳源； 显微镜直接计数 （2）压榨； 萃取（注：两空可颠倒）
（3）固定化酶 （4）（Taq）DNA聚合酶； （低温）复性（或退火）； （中温）延伸
（2014四川）10.有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境。研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示。
（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、________四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是__________。
（2）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和_______，这些植物激素一般需要事先单独配置成_________保存备用。
（3）纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域的第一条线上无菌落，其它划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有________。
（4）为探究苯磺隆的降解机制，将该菌种的培养液过滤离心，取上清液做图乙所示实验。该实验的假设是________，该实验设计是否合理？为什么？_______。
【答案】（1）氮源和无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖
（2）细胞分裂素 母液 （3）接种环 ①接种环灼烧后未冷却；②划线未从第一区域末端开始
（4）目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白质。 不合理，缺少空白对照
2013年
（2013新课标卷Ⅰ）39．回答下列有关泡菜制作的习题：
（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是 。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是 。
（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行 的过程。该过程发生在乳酸菌的 中。
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有 、 和 等。
（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是 ，原因是 。
【答案】（1）消灭杂菌 增加乳酸菌含量
（2）无氧呼吸 细胞质
（3）温度、食盐用量、腌制时间
（4）乳酸菌数量增加，杂菌数量较少 乳酸菌比杂菌更为耐酸
（2013新课标卷II）39.临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。
回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用___________法或_____________法将样本借种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。
（2）取该单菌落适当稀释，用________法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_______；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明__________________________________________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的____________。
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_____________。
【答案】（1）划线 稀释涂布（或涂布） （2）涂布
（3）敏感 不敏感 该致病菌对C的敏感性比对A弱 耐药菌 （4）A
（2013海南卷）30.根据生物相关知识，回答胡萝卜素提取和酶应用方面的问题：
（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，通常在萃取前将胡萝卜粉碎和 ，以提高萃取效率；水蒸气蒸馏法 （填“适合”或“不适合”）胡萝卜素的提取，原因是 ；鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时，通常可采用 法，并以 样品作为对照。
（2）若要提高衣物上血渍的去除效果，可在洗衣粉中加入 酶，因为该酶能将血红蛋白水解成可溶性的 或 ；若要提高衣物上油渍的去除效果，洗衣粉中可添加 酶；使用加酶洗衣粉时，水温过低或过高时洗涤效果不好的原因分别是 。
【答案】（1）干燥 不适合 水蒸气蒸馏法适用于蒸馏挥发性物质，而胡萝卜素为非挥发性物质，不能随水蒸气蒸馏出（3分） 纸层析（2分） 标准的胡萝卜素（2分）
（2）碱性蛋白（或蛋白） 氨基酸 小分子肽 脂肪 水温过低时酶活性较低，水温过高会使酶变性失活（2分）
（2013山东）34.(8分胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得，流程如下：
（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用 或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环其目的是 。
（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供 和 。
（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和 ，以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用 方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤。其目的是 。
（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为 。
【答案】（1）稀释涂布平板法 灭菌（防止杂菌污染） （2）碳源 氮源
（3）时间 水浴 滤去不溶物 （4）(实验)对照
（2013四川）10．由于酵母菌利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程菌菌种（过程如图甲所示）。
图甲 图乙
（1）图甲中，过程①需要的酶有_____________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以____________作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是______________。
（2）某间学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。
（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________。
（4）用凝胶色谱法分离α一淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________。
【答案】（1）限制性内切酶和DNA连接酶 淀粉 分离纯化（PS：关键点在第二步操作中的“选取”）
（2）稀释涂布法 菌液稀释浓度较大
（3）工程酵母菌 工程酵母菌利用淀粉能力更强，产生CO2速率更快
（4）较小
2012年
（2012新课标)39.为了探究6－BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6－BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率(m)，以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n),结果如下表。回答下列问题：
(1)按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为 和 两类。上述培养基中，6－BA属于 类生长调节剂。
(2)在该实验中，自变量是 ，因变量是 ， 自变量的取值范围是 。
(3)从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是 号培养基。
(4)为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入 (填“6－BA”或“IAA”)。
【答案】 (1)大量元素；微量元素；细胞分裂素 (2)IAA的浓度；再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)； 0～0.5mg/L (3)1 (4)6－BA
（2012海南)30.回答下列关于腐乳制作的问题：
（1）腐乳是豆腐经微生物发酵后制成的食品。多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是 ，其产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为 和 ；其产生的 能将豆腐中的脂肪水解为 和 。
（2）发酵完成后需加盐腌制，加盐还可以抑制 生长。
（3）腐乳制作的后期可加入由酒和多种香辛料配置而成的卤汤。卤汤具有一定的防腐作用外，还能使腐乳具有独特的 。
【答案】（1）毛霉 肽 氨基酸 脂肪酶 甘油 脂肪酸（每空2分，共12分）
（2）微生物（2分） （3）风味（1分，其他合理答案也给分）
（2012山东)34．辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。
（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的 和 过程。
（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是 。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值 （填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是 。
（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是 。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是 和纤维素酶。
（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是 。
【答案】（1）脱分化（或去分化） 再分化 （2）琼脂 低 高压蒸汽灭菌
（3）70% 果胶酶 （4）防止有机溶剂挥发
专题十 生物技术实践
共2个考点
考点1 微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用
（2015新课标卷Ⅰ，39，15分）39.[生物——选修1：生物技术实践]
已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于 染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用 （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ℃设计后续实验。
【答案】（1）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 萃取法
（2）油脂
（3）血细胞计数板 稀释涂布平板
（4）45 40
【解析】（1）脂肪可被苏丹Ⅲ（Ⅳ）染液染成橘黄色（红色）；题干中说明微生物A产生的油脂不易挥发，则可以采用萃取法提取微生物A中的脂肪。
（2）油脂为有机化合物，富含C元素，故为了从自然界获得能够分解油脂的单菌落，应以油脂为唯一碳源来配制培养基。在该培养基上，能分解油脂的微生物可以正常生长，其他微生物不能正常繁殖。
（3）可利用血球计数板计数法测定菌液中的微生物数量，计数时，活菌和死亡的细菌都会被计数，所以测定培养液中的活菌数应采用稀释涂布平板法。
（4）在45℃时，降解10g油脂所需酶的数量最大，则该温度下酶活性最低；由题干可知，40℃时分解10g油脂所需的酶的数量最少。应在40℃左右范围内设置不同温度梯度来探究酶的最适活性。
考点2 酶的应用和生物技术在其他方面的应用
（2015新课标卷Ⅱ，39，15分）39.【生物——选修1：生物技术实践】（15分） 回答与胡萝卜素有关的问题：
⑴胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是 （填“α-胡萝卜素”，“β-胡萝卜素”或“γ-胡萝卜素”），该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子 ，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该病疾称为 ，胡萝卜素是 （填“挥发性”或“非挥发性”）物质。
⑵工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时， （填“需要”或“不需要”）将新鲜的岩藻干燥。
⑶现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的 作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是 。
【答案】⑴β-胡萝卜素 维生素A 夜盲症 非挥发性（每空2分，共8分） ⑵需要（2分）
⑶乙酸乙酯（2分） 萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇属于水溶性有机溶剂，影响萃取效果（3分，其他答案合理也给分）
【解析】该题考查胡萝卜素的相关知识及与其萃取有关的知识，难度较小。
⑴胡萝卜素的化学分子式中包含多个碳碳双键，根据双键的数目可以将胡萝卜素划分为α、β、γ三类，β-胡萝卜素是其中最主要的组成成分；一分子的β-胡萝卜素在人或动物的小肠、肝脏等器官被氧化成两分子的维生素A；由于饮食中缺乏维生素A或因某些消化系统疾病影响维生素A的吸收， 致使视网膜杆状细胞没有合成视紫红质的原料而造成夜盲(暂时性夜盲症可由补充维生素A得以痊愈)。
⑵提取胡萝卜素时新鲜的岩藻具有大量的水份需要进行干燥。
⑶乙酸乙酯属于水不溶性有机溶剂与水不互溶，能够溶解胡萝卜素；乙醇是水溶性有机溶剂，因萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以不用它们作萃取剂。
（2015新课标卷Ⅰ，39，15分）39.[生物——选修1：生物技术实践]
已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用于 染色。微生物A产生的油脂
不易挥发，可选用 （填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以 为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用 直接计数；若要测定其活菌数量，可选用 法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中， ℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕 ℃设计后续实验。
【答案】（1）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 萃取法
（2）油脂
（3）血细胞计数板 稀释涂布平板
（4）45 40
【解析】（1）脂肪可被苏丹Ⅲ（Ⅳ）染液染成橘黄色（红色）；题干中说明微生物A产生的油脂不易挥发，则可以采用萃取法提取微生物A中的脂肪。
（2）油脂为有机化合物，富含C元素，故为了从自然界获得能够分解油脂的单菌落，应以油脂为唯一碳源来配制培养基。在该培养基上，能分解油脂的微生物可以正常生长，其他微生物不能正常繁殖。
（3）可利用血球计数板计数法测定菌液中的微生物数量，计数时，活菌和死亡的细菌都会被计数，所以测定培养液中的活菌数应采用稀释涂布平板法。
（4）在45℃时，降解10g油脂所需酶的数量最大，则该温度下酶活性最低；由题干可知，40℃时分解10g油脂所需的酶的数量最少。应在40℃左右范围内设置不同温度梯度来探究酶的最适活性。
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