【www.guakaob.com--节日作文】
[每日农经]爱舔“石头” 黔北麻羊赚钱有高招 20160428
黔北麻羊好奇怪，居然爱吃石头块，其中有些小秘密，养好麻羊财源开!
记者 王玥：哇，好硬啊，你说它们到底在舔什么呢?而且这块石头看起来就是普通的那种磨砂石头一样。
这是我们的记者王玥在贵州省习水县采访时发现的一件怪事，爱吃这种看似磨砂石头的羊就是当地的地方品种黔北麻羊。黔北麻羊长相有几分特点，难道跟爱吃石头有什么关系吗?
穆林：黔北麻羊主要分布在黔北地区，毛色以麻色为主，头部有两条典型的白线，背部颈部和四肢的正前方毛色较深，耳朵小，向前直立，肚皮上的毛色是草白色，抗病力强，适应力强，耐粗饲。
黑色的背脊和黑色的颈圈，还有紧凑的身板儿，构成了黔北麻羊独特的地方特征，不过让王玥不解的是，这里的羊为什么对砖块如此感兴趣呢?
李世春：这是羊的饲料，叫舔砖。
什么?饲料?长得还真够古怪，乍一看就是一块人造大理石砖。
王玥：好重啊，差不多有10斤吧，而且感觉它特别扎实。听到没有，这个声音都特别扎实，特别沉，在羊圈里多久会换一块?
李世春：那就要看羊的多少了，一般一个圈舍里5只羊的话，两个月换一次。3个月龄时开始舔的话，舔到9月龄，40元1块。
舔砖到底是一种什么样的饲料?为什么要给黔北麻羊吃舔砖呢?
李世春：这里面含有很多矿物质，吃了的话代谢更加好，长得更健壮，不吃的话采食不怎么好，还有它毛色不光亮。含很多微量元素，如钾、钙、磷等等，羊吃了毛色好，胃口好。
王玥：真的没想到它们爱舔这个砖哈，它们都是资深的吃货，看谁是最资深的，我先用这个来吸引，看它到底能不能跟我走。其实羊是天生的胆小，一般我们进去羊就离我们特别远，但是在美食的诱惑下，都已经不怕我了。啊，你看都过来了。
羊平时就在圈里舔舔这些石头，就跟嗑瓜子似的，除此之外，养殖户喂些什么饲料呢?
在习水的马临乡，王玥似乎找到了答案。
王玥：你看，黑麦草，这个是羊最喜欢吃的青饲料，你看，这绿油油的一片长得多好，都快齐腰了，请问你一天割多少啊?
养殖户：1000多斤。
王玥：大约能喂多少羊?
养殖户：500只左右。
王玥：四五百只，你家有这么多只啊?
养殖户：我家没有。
王玥：你家没有，割草干什么呢?
李群英：卖给养羊的老板，一亩地一年能卖3000~4000元。
王玥：你自己为什么不养呢?
李群英：没有资金，什么都没有，我就种地卖草。
杨泽是这些黑麦草最大的买家之一，不仅如此，他还是马临乡黔北麻羊的最大买主，这是怎么一回事呢?
杨泽：小王，这个就是我们当地最纯正的黔北麻羊的种公羊。
王玥：种公羊啊这是?!
杨泽：这只种公羊两万元我们场都不会卖。
王玥：啊，我看到这个种羊长得是非常地英俊，而且非常有气质看起来，但是我看五只在一个圈里啊，它们不会打架吗?
杨泽：不会的，这羊实际上很温顺。
王玥：我拍过种公羊，其实见到的种公羊都是很凶的。
杨泽：不相信你也可以进去看看。
王玥：它真的不会顶我吗?
杨泽：不会不会。
王玥：真的假的?但是我心里还是很忐忑。
这几只公羊个个都在80公斤以上，看看它们威武雄壮的气势，加上头上那对望而生畏的犄角，一只公羊都难以对付，更别说五只了，王玥进入羊圈真的会安全吗?
王玥：好吓人啊，虎视眈眈地看着我。种公羊其实挺温柔的，但是我一直没有找到机会跟它去亲密接触，我靠近它的时候，它就在往后退。
杨泽：其实这个羊我心里是有数的，像主持人这样进去的情况下呢是不会攻击的，除非你伤害到它。
不过没有脾气并不是羊的真性情，一旦你惹恼了它，发起脾气来谁都挡不住。
原来，羊的领地意识很强，这只不速之客进入另一群公羊的领地，就遭到了这个圈舍领头羊的教训。
李世春：不是同圈舍的羊，跑进去以后，体格大的那只跟它单挑，两只羊对打，输了的那只就会选择不会再打了，因为它没有能力再去反抗。
公羊：你们慢慢打，我歇着。
这边两只公羊打得不可开交，在杨泽的养殖场里，一场种公羊的跳高秀正在上演。
王玥：真的没有想到这个羊会飞呢，是飞檐走壁的飞哈，羊在墙壁上不停地爬来爬去，现在真的是开了眼了。你看现在我准备了一个卷尺，先量一下这个到底有多高。1.4米。感觉跳过1.4米是轻轻松松的。
杨泽：再高二三十厘米也没事。
王玥有些纳闷，种公羊在圈舍跳来跳去仅仅是为了好玩儿吗?
杨泽：它跳来跳去是为了找摇尾巴的羊。
羊：这个不是。这只也不是。哦，终于找到你了。
杨泽：母羊发情的时候会摇尾巴，比如说它跳过来了，发现没有，它还会继续往前面跳，去找。
原来，种公羊是在寻找心仪的伴侣，在围墙上的精彩表演只是为了吸引母羊的注意。
穆林：公羊好就好一坡，繁殖方面的话，公羊至关重要，产仔率，包括羊羔出生重量，以及生长速度，都有很大的关系。
为了保证黔北麻羊的品种纯度，这不，杨泽通过圈养的方式对种羊进行管理，黑麦草是这个季节羊的主粮，而且还跟周围的养殖户结成了联盟。
杨泽：我们提供标准的羊羔，农户帮我们代养，代养以后，我们买回来育肥。
王玥：走得好快啊(
王玥：这个怎么抱啊?这只羊多大了，还挺重的呢?
李世春：20天了。
王玥：它是不是一直挣扎想找妈妈?这样，我们把它放地上好不好。小羊羔真的是好可爱啊。20天的小羊，它的这个外形的特征已经是很明显了，头部是两条白线，身上有一条黑色的毛，腿部前方，四条腿都有黑色的毛。耳朵也是立耳。基本上黔北麻羊的特征都在20天的小羊身上体现得特别明显。
穆林：经常母羊的双羔率在80%~90%，产得多的有三四个。
黔北麻羊的生产性能强，但是生长速度却没有优势，一般，饲养一年半出栏，商品羊的体重在60公斤左右。长期以来生活在崇山峻岭之间，自由采食，具有很强的适应力。每天罗安兵跟他的妻子就要把羊赶到离家两公里外的后山去放养。
王玥：每天都放出来，几点钟放?
罗安兵：下午两点。
王玥：罗大哥，你的羊跑了，你等等我。
放归山林，顺应羊的习性，这种意外，对罗安兵来说每天都要面对。
王玥：一只羊都看不见了。
罗安兵：全部钻树林了。
王玥：羊怎么跑这么快啊?
罗安兵：每天都跑这么远，有时候跑几公里，熟悉这些地势了，哪里有好吃的，它的目标就往好吃的地方去。
习水县山地资源丰富，有优越的自然条件和养殖环境，草山草坡就是黔北麻羊的天然牧场。
王玥：你们这些羊吃什么啊，跑的这么快?
罗安兵：吃这些草啊，植被啊，你看，这是柴胡。
王玥：这个我认识，是柴胡，好清香啊，这个应该我们都能吃吧?
罗安兵：能吃。还有野豌豆，是一种中药，可以烫火锅吃的。
植物的多样性，给羊提供了丰富的饲料来源，但是王玥却在为另一件事担心。
王玥：羊一直在山上吃，会破坏生态吗?
罗安兵：羊是有一定数目的，它的嘴就像剪刀一样，把这些树修剪得相当于绿化的草一样，像这种，长得不是很高，长起来一片绿油油的，非常漂亮。
王玥：其实有助于青草的生长。
罗安兵：它走过的路每天吃了以后，粪便拉在上面，相当于施肥，把土质改善了，植被长得比人工种的还要好得多。
黔北麻羊白天在山上吃鲜嫩的青草，回家还要吃特殊的饲料舔砖，这些悠闲自在，生活在青山绿水之间的黔北麻羊，品质自然差不了，是它们，培养了习水人爱吃羊肉的习惯。
王玥：你看看习水，当地人早餐都爱吃一碗羊肉粉，你看羊肉粉馆里排起了长队，不知道味道怎么样，一会儿我也来尝一下。你看这一碗看起来好诱人啊，好香啊。
王玥：羊肉嚼起来非常细腻，而且羊肉味很浓，基本上没有什么膻味的。然后羊肉是带着皮的，和肉混在一起，口感非常好。你看这碗羊肉粉，又有红油，配上这个羊肉，吃起来真的很过瘾。
羊肉好吃才是关键，吃得过瘾吃不腻的是常来常往的习水人。
消费者：味道比较纯正。
消费者：从小吃到大，感觉已经习惯了。
消费者：本地的羊肉味道挺鲜美。
消费者：不辣，因为这个羊肉很好吃。
消费者：没有膻味。
王孝平家的羊肉粉店是城里最火的餐馆，每天早上5点多他就开始忙碌。羊肉必须是新鲜的，皮张不用剥离，骨头剔除干净，连分割都有自己的规矩。
王孝平：不论一头羊的大小，平均分成4份，后腿一部分，肚腩皮、五花肉一部分，前腿一部分。
黔北麻羊肉质细腻，膻味很小，但是要完美呈现南方山羊肉细腻鲜嫩的灵性，离不开王孝平精选的作料调制。
王孝平：哪一种料的多少全靠自己的感觉和经验来定。羊肉的汤要讲究鲜度，汤的清亮度和清澈度。
煮熟的羊肉冷却后切成薄薄的肉片，在一碗滚烫的米粉里撒上几片，再浇上两勺香喷喷的羊肉汤。吃之前搅拌几次，让米粉充分入味，米粉裹着羊肉片送入口中，劲道弹牙，绵软适口，是当地人早餐的首选。
消费者：羊肉粉七八元一碗。
王孝平：少的时候七八千元，多的时候卖到一万七八千元。
除了羊肉粉，红烧羊肉也是地道的习水吃法。
王玥：啊，这个羊肉看上去好诱人啊，我在这就能闻到它的香味儿了，而且这个羊肉都是带着这个皮，我都想象得到羊肉吃到嘴里的口感，而且辣椒的香味混在一起，我都受不了啦，你看我都准备好了，尝尝!
钟正飞：这个不能吃。
原来这是人家网购的。
钟正飞：羊肉一年大概卖3万斤左右，外卖的羊肉大约一万四五。每年的纯收入大约八九十万。
网络销售和现代发达的物流，给喜欢吃黔北麻羊肉的消费者提供了方便，130元1斤的熟羊肉也能畅销。
张易：一个星期网上卖出了200多斤。
随着市场销路的拓展，黔北麻羊赢得了消费者的喜欢，养殖户也获得了不错的经济收益。
经销商：我们卖的全都是习水的农特产品，一周的销量差不多10万，其中羊肉占20%。
杨泽：6000只羊仅仅是供给上海和苏州4家店，2017年我们的销量应该能达到5万只。
杨中福：一年卖20多头，每年卖五六万。
罗安兵：按照现在算的话，500只羊有200多只母羊，500多只流向市场，平均一只七八百元，一年在30万只左右，除去成本，人工种草，机械，汽车运输下来有20多万的纯收入。
陈开满：收益没有具体算过，大概一年劳力钱10万元要挣，公羊的话去年掉点价，我都要卖23元左右1斤，少了我不卖。母羊15元1斤。
习水县属于国家级贫困县，给黔北麻羊吃舔砖看似噱头，其实正是养殖户们的精细饲养，才保持了黔北麻羊独具魅力的品质和口感，在上海、江苏、浙江等发达地区打开了市场，助推当地精准扶贫的效果开始凸显。
苟明利：围绕电商为抓手，拓展直营和加盟这样一个渠道，带动4万户农户来种草养畜，带动精准扶贫户的增收，目前存栏是39万只，出栏达到29万只，带动2.5万户发展黔北麻羊，预计在2020年达到100万只的饲养规模，实现产值达到20亿以上。
今天我们将看到黔北麻羊在当地脱贫致富中发挥的突出作用，麻羊是黔北地区的传统品种，为什么如今的效益比过去有这么大的提高呢?关键是他们采用了更加科学的饲养方式，并且打开了更广阔的市场。精准扶贫是高效率的扶贫，找到了问题的关键所在，把本地传统农产品的优势充分发挥出来，这样的做法应该说是比较精准的。
黔北麻羊作为贵州省优良的地方山羊品种之一，它属于短毛型皮肉兼用型山羊，在贵州省的遵义市、赤水市、仁怀市、桐梓县、金沙县等地都有所分布。在本期的节目当中，就主要从种羊的选择与饲养、妊娠母羊饲养、哺乳期饲养、羔羊饲养、育成期饲养、育肥期饲养等方向详细的向观众朋友们介绍了黔北麻羊的养殖技术。
相关知识：
黔北麻羊是贵州省三大优良地方山羊品种之一，该品种是产区劳动人民长期选育和自然选择的产物，对当地的自然生态条件具有良好的适应性。具有耐粗饲、抗病力强、适应性广、肉质鲜美细嫩、皮张品质好、生产性能优等特点。2009年5月在农业部组织的新遗传资源审查鉴定过程中，农业部专家组对该品种给予了很高评价，认为“黔北麻羊确有特点特色，与成都麻羊有较大区别”，从而顺利地通过了专家组现场鉴定，并于同年12月被农业部专家委员会批准为新遗传资源。
黔北麻羊属短毛型皮肉兼用山羊，体质结实，胸宽深，背腰平直，颈部粗壮，被毛有荼褐色和淡褐色两种，有黑色背线和黑色颈带，幼年羊被毛色浅，成年毛色变深。黔北麻羊屠宰率为56.6%,产肉性能好，繁殖率高，抗病力强，适应山区粗放饲养，具有较大的发展潜力。
相关新闻：
金黔在线讯 日前笔者走进习水县双龙乡双龙村，不时看到一群群膘肥体壮的黔北麻羊被牧羊人赶进大山的草场。“现在养羊销路好，技术有保障，简直是条致富的好门路。”村民陆远卫兴奋地说，2011年，他出售黔北麻羊80余只，获利6万多元，目前圈里还存栏130多只。
黔北麻羊是一个地方优质肉羊品种，主产于赤水河流域的习水、桐梓、金沙等县，中心产区的习水县存栏20余万只。2011年，习水县被国家农业部授予肉羊标准化示范县。近年来，随着羊肉菜肴越来越受欢迎，市场对羊肉的需求量也越来越大。
习水县抓住这一机遇，采取多项措施，推进麻羊产业快速发展。2007年以来，该县按照“建设一个体系、形成一批龙头、创立一个品牌、带动一项产业、致富一方百姓”的思路，建立了投入品监管制度、生产记录制度、质量安全监测制度、产地准出制度和质量追溯制度，采用国家标准5项、地方标准1项、农业行业标准7项，制定了地方标准5个，形成了“习水县肉羊养殖综合标准体系”，建立了贯通产前、产中、产后全过程的生产控制技术规范。
2011年，该县投入资金2020.12万元，带动社会投入资金1500多万元，发展30只规模以上的养殖户512户。目前形成了以习水县富兴牧业有限公司、群力养殖专业合作社和温水镇目里黔北麻羊保种区为示范载体，以东皇、良村等5个乡镇的14个村为示范区，共发展标准化示范企业3个，示范户1080户。
该县三岔河乡结合2011年开展的“集团帮扶、整乡推进”扶贫项目，用600万元扶贫项目资金发展黔北麻羊养殖，使许多外出农民工回乡投资创业发展黔北麻羊养殖。预计到2012年底，该乡年出栏黔北麻羊20000余只，农民人均纯收入达5000元以上。下一步，习水县将通过政府引导、政策扶持、部门联动、市场运作的模式，实现以圈养为主，放养为辅的现代养殖方式，努力实现2015年全县黔北麻羊养殖存栏100万只。
黔北麻羊养殖技术
一、黔北麻羊羊舍的建造
黔北麻羊羊舍的建造也是养殖过程中一个十分重要的环节，羊舍设计建设之前一定要保证有充足的采光和必要的设施。在养殖过程中只有保证全面的养殖设备齐全才能确保羊肉的品质和质量，同时，羊舍在建设过程中一定要考虑到羊舍的温度，确保羊的圈舍内部的温度适宜，一般情况下羊舍内部的温度控制在0～15度比较适合，此外，还要注重环境通风，确保新鲜空气都能进入到羊舍内部。在养殖过程中为了防治疫情的出发，羊舍内部也应该保证湿度适合，一般情况湿度维持在60%比较合适。
二、黔北麻羊羔羊的饲养管理
黔北麻羊母羊生产以后的2个小时之内，应该保证黔北麻羊羔羊吃足母奶，黔北麻羊羔羊出生一周之后就可以吊草把，将香料炒香，引诱羔羊食用，并用切碎的青草喂食。当出生两周以后，可以向饲料中添加麦麸、玉米糊等精饲料。出生一个月之后就不需要将精饲料煮熟饲喂。出生两个半月之后，可以向其饲料中添加豆饼、骨粉等，并保证充足的饮食。对于体质较弱的羔羊应该加强母羊的养护，对于奶水不足的黔北麻羊母羊可以用其他母羊代替饲喂。并做好及时断奶工作。早配种配种的黔北麻羊公羊应该在出生4个月内进行断奶，对于发育较差或计划留种的羔羊适当可以延长时间，但是最多不能超过四个半月。断奶之后，黔北麻羊羔羊仍然留在圈舍中饲养，黔北麻羊母羊给力混入羊群。早断奶对于提高黔北麻羊母羊再次发情及时配种，提高年产胎数有着十分重要的作用。
三、黔北麻羊整顿羊群，分群饲养管理
要及时调整黔北麻羊羊群，根据黔北麻羊羊只年龄、性别、强弱、肥瘦、生产性能和不同的生理时期合理分群。分群后，根据不同情况，分别制定饲养管理标准进行饲养和管理，尽量满足不同类群和不同生理时期羊群对饲料和营养的需要。
四、养好黔北麻羊种公羊和种母羊，做到适时配种
黔北麻羊配种前一个月，应使种公羊进入配种期的饲养管理，配种时种公羊、种母羊都要保持良好的营养水平，以保证受胎率，由于种公羊的性欲与其日粮中蛋白质的含量有一定的关系，因此在种公羊的日常饲料中应适量加入蛋白质饲料，可以有效提高种公羊的性欲，增加其射精量和密度，用这样的种公羊进行配种可以提高配种的成功率。当配种开始后，要根据种公羊的体质、配种任务、性欲等来适量补喂一些精料或营养品，使其能够迅速恢复体力，为下一次的配种做好准备更好的实现多胎、多产、高繁，进而提高养羊的经济效益。对育成公、母羊要适时配种，由于自然条件和饲养管理条件的不同，羊配种有早有晚。一般种公羊10～12月龄或体重达到70～80kg，种母羊9～10月龄或体重达到50kg左右时，就可进行初配，初配不宜过早，如过早，母羊产单羔多，弱羔多，难产多，育羔成绩差，母羊发育受阻。
五、黔北麻羊防疫和驱虫技术
黔北麻羊防疫一般在春秋各进行1次，春季3～4月份，秋季10～11月份进行，注射羊三联（或羊四联）苗、炭疽苗、巴氏杆菌苗等疫苗。应该注意的是，注射一种疫苗后，隔15天方可注射另一种疫苗，两种疫苗不能同时使用。当地从未发生过的疫病，不能滥用疫（菌）苗注射，使用疫（菌）苗应在兽医人员指导下进行。 要定期驱除体内外寄生虫，每年1次或每季度1次，在兽医人员指导下进行。无论是防疫还是驱虫，对怀孕后期（妊娠3个月以上）的母羊都要慎用，以免造成流产。
六、黔北麻羊饲草料的增减与变更技术
在黔北麻羊饲养管理过程中，切忌供给羊只草料量的猛增猛减和突然变更。羊属反刍家畜，在正常情况下，瘤胃、网胃中的各种微生物处于一个微生态平衡状态，当草料猛增或突然变更时，微生态平衡遭到破坏，微生物区系发生变化，有害微生物加快繁殖，容易引发疾病造成死亡，如羊肠毒血症、羊快疫、链球菌病等。因此，草料的增与减，草料的变更都应循序渐进。抓放养，保膘力
初秋的天气，一般情况下早晨和晚上都比较凉爽，但是中午还是比较热，此时对黔北麻羊羊群的放养还需要延续夏季放牧的方法，中午要使黔北麻羊羊群能够在阴凉的地方避暑，早晨早点放出去晚上晚点收回家，适当延长放牧的时间；晚秋天气可能有霜，放养黔北麻羊羊群做到有霜天气冷，早上晚出牧，晚上晚收牧；无霜天气早上早出牧，晚上晚收牧。每天要坚持把黔北麻羊羊赶到有井水或泉水的地方饮水2次，不能饮用受到污染的水。还要注意给黔北麻羊羊保暖，在黔北麻羊羊圈里生火或者有条件的地方可以安装取暖器。山区应把黔北麻羊羊赶到牧草长势较好的向阳坡地放牧。秋季牧草开花结籽，营养丰富，正是抓膘季节，有利于满膘配种。
七、半年以内的黔北麻羊羊羔羊不宜饲喂尿素
尿素可作为非蛋白氮给羊补充蛋白质，在瘤胃中尿素先被微生物分解并消化吸收，将其变为菌体蛋白后才能被羊消化吸收和利用。由于半年之内的黔北麻羊羔羊前胃发育不健全，微生物区系尚未形成，微生态环境尚未完善，草料中添加尿素易引起尿素中毒，另外，尿素也不宜与豆类及豆粕、苜蓿等豆科植物性饲草（料）混喂黔北麻羊（包括其它反刍动物），因为豆类及豆科牧草中含有脲酶，易加快尿素分解，直接进入循环系统，引起黔北麻羊羊群中毒。妊娠最后3个月的黔北麻羊母羊不宜喂添加尿素的青贮，因其对黔北麻羊胎儿发育有害。
八、黔北麻羊羊群饮水喂饲与圈舍卫生管理
注意草料及饮水卫生，做到饲槽、水槽干净卫生，草料无毒、无霉变、无杂质、无禁用添加剂，喂饲饮水要有规律，饮水应新鲜清洁。黔北麻羊圈舍应做到通风透光、防寒防暑、干燥卫生，勤出勤垫勤打扫，定期消毒、
九、黔北麻羊应加强运动，常晒太阳
舍饲黔北麻羊容易产生维生素D缺乏症，进而影响钙的代谢。定时放牧，目的不在于采食，而在增加运动和进行日光浴，促进体内维生素D的形成，促进钙的代谢。尤其是妊娠后期的黔北麻羊母羊，增加运动，防止死胎、弱胎、黔北麻羊母羊难产及产前后瘫痪是十分必要的。运动还可提高种黔北麻羊公羊的精液品质，提高配种受胎率。
此文档word版本下载后可任意编辑修改
第一章 总论
1.1项目名称及性质
1.1.1项目名称：5000只黔北麻羊养殖场建设项目
1.1.2项目性质：新建
1.2项目建设单位
1.2.1 XXX有限公司
1.2.2法定代表人：XXX
1.3可行性研究工作依据和范围
1.3.1可行性研究工作依据
a) 《国务院关于促进畜牧业持续健康发展的意见》（国发 „2007‟4号）。
b)《国土资源部、农业部关于促进规模化畜禽养殖有关用地政策的通知》（国土资发[2007]220号）。
c）《农业部关于加快推进畜禽标准化规模养殖的意见》农牧发[2010]6号。
d）国家产业政策以及省、市、区畜牧业发展规划。
e）财务效益评价按国家《建设项目评价——方法参数》进行规范化计算和财务经济分析。
f）机械设备价格依据各专业生产厂家报价比较后综合估算。
g) 土建工程依据当地同类工程造价比较估算。
1.3.2可行性研究工作的范围
a）建设规模及规划布局，环境分析。
b）黔北麻羊场地条件分析。
c）技术的可靠性分析。
d）生产销售的可靠性。
e）工程投资、成本估算和经济效益评价。
1.4建设规模
按年饲养黔北麻羊5000只设计。配套建设羊舍、饲料加工厂、防疫、办公、生活等设施。
1.5建设地点和条件
1.5.1建设地点
本项目拟在某某省某某市习水县马临区建设标准化黔北麻羊养殖场一处，占地面积约30亩。
1.5.2建设条件
项目建设地点位于某某省某某市习水县马临区。该场址地势森林覆盖率高，水源充足，交通运输便利，建设条件良好。
1.6建设内容与建设期限
1.6.1建设内容
按年饲养肉羊5000只设计。配套建设羊舍、饲料加工厂、防疫、办公、等设施。
1.6.2项目建设期：1年（2015-2016年）。
1.7投资规模与资金来源
1.7.1投资规模
项目总投资433.16万元。
1.7.2资金筹措
项目总投资433.16万元，项目建设资金单位自筹33万元，通过客商投入400.16万元资金。
1.8经济效益分析
项目总投入433.16万元，每年可实现利润98.04万元。静态投资回收期2.8年，折现率10%的情况下，动态投资回收期3.45年，财务内部收益率为16.51%。
1.9综合评价和论证结论
1.9.1综合评价：生产经营模式“公司+基地+农户”，符合当地政府有关产业政策，建设规模适宜，资金安排合理。项目设计方案合理，先进实用。首先是政府财政支持、其次技术上支持，再者全城上下所有政府、百姓都极力向外推销介绍。项目设计中兼顾了资源综合利用，不会造成环境污染问题。
1.9.2论证结论：该项目从建设规划、投资规模到经营管理均切实可行，立项目标准确，经济效益、社会效益和生态效益处理和谐，对调整农村和农业产业结构，增加农民收入具有重大的现实意义。
第二章 项目背景及必要性
2.1项目建设背景
2.1.1行业发展规划。“十二五”时期，省农业农村工作要紧紧围绕实现省跨越式发展奋斗目标，牢固树立“重中之重”战略思想，坚持把保障和改善民生作为工作的出发点和落脚点，把促进农民收入持续快速增加作为中心任务，把夯实农业农村发展基础作为工作重心，把推进农业农村经济结构战略性调整作为实现科学发展的重要途径，把发展现代农业作为加快转变经济发展方式的重大任务，把深化改革创新作为农业农村发展的根本动力，着力推进社会主义新农村建设，加快形成城乡经济社会一体化发展新格局，积极培育农民新型合作组织，大力改善农村金融服务，进一步深化农村各项改革。
2.1.2区域发展规划。随着城乡居民生活水平的提高，膳食结构不断改善，羊肉供不应求，还有政府财力等相关政策大力支持，极大地促进了农户养羊的积极性，并成为调整产业结构、综合开发、增加农民收入脱贫致富的有效途径。习水县政府把养殖业、种植业作为农民增加收入、调整农业生产结构的大事来抓，充分发挥龙头企业的示范、带动作用，积极引导群众农户发展散户养殖。
）：１１５，４３（８６８～１７００ 贵州农业科学 ２
ｕｉｚｈｏｕＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ Ｇ ｇ
）０［文章编号］１６４１３０１０１（２０１５８４５６８０３０００－－－－
精料补饲对黔北麻羊泌乳母羊生产性能的影响
陈扬，施晓丽＊，罗卫星，代从飞，吴昌彬
）（贵州大学动物科学学院，贵州贵阳５５００２５
，１～２，产羔（摘 要］为科学制定黔北麻羊泌乳母羊的补饲方案，选取体重约为３０ｋ７±２）ｄ ［ｇ
／胎ｆ肉羊饲养标准》（ｅｔｕｓ的黔北麻羊泌乳母羊１８１６－２００４）山羊泌乳８只，随机分成３组，参照《ＮＹＴ
）、１）和１）补饲精料，前期的营养需要，分别按饲养标准的８０．４ｋ００％（０．５ｋ２０％（０．６ｋ０％（ｇｇｇ
各组试羊采食等量青粗料，以研究补饲精料对黔北麻羊泌乳母羊、泌乳量和羔羊体重的影响。结果表明：
，１，８）ｄ增重１．３补饲１Ｐ＜０．００％精料母羊全期（３ｋ５）００％组母羊失重０．１５ｋ０％组母２０～３０ｇ（ｇ
＊
）与母羊体重（）间存在线性关系，ｙ＝－１）。补饲量（羊失重２．３Ｐ＜０．０ｘ，ｋ４ｋ５０．２８５ｇｇｇ（ｙ，ｋ
＊
（（）＋１。补饲１Ｒ２＝０．７Ｓ±１．６±３．２９０９．７１２３０）ｘ，（０，ＲＤ＝１．３０，Ｐ＝０．０００）５ｄ和３０ｄ，）。、（后精料补饲水平对黔北麻羊泌乳母羊泌乳量羔羊体重均无显著影响Ｐ＞０．０５补饲精料可以减少
／（／］为青粗料、高粱壳［母羊的失重，以母羊无失重为标准，在以青饲玉米［ｄ·只）２．３ｋ０．１ｋｇｇ
（·只）］为粗饲料的基础上，精料适宜补饲量为０．５／（·只）。ｄ２ｋｄｇ
［关键词］黔北麻羊；体重；失重；泌乳量；精料补饲；母羊生产性能
［［文献标识码］Ａ中图分类号］５１Ｓ８
ｆｅｃｔｓｏｆＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｅＳｕｌｅｍｅｎｔｏｎＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆＥｆ ｐｐＥｗｅｓｏｆＱｉａｎｂｅｉｍａＧｏａｔＬａｃｔａｔｉｎ ｇ
＊
，，，，ＷＵＣＨＥＬＵＯ Ｎ ＹａｎＳＨＩＸｉａｏｌｉＷｅｉｘｉｎＤＡＩＣｏｎｆｅｉＣｈａｎｂｉｎ ｇｇｇｇ
（ｏｎｃｕｎｕｕ５ｈｌｌｅｅｉｍａｌｉｅｎｃｅ，ｉｚｈｏｕ ｉｖｅｒｓｉｔｉａｎｉｚｈｏｕ５００２５，ｉｎａ）ＣｏＡＳＧＵＧＧＣ ｇｙ，ｙｇ，ｆ
：ｂｓｔｒａｃｔ１８ｌａｃｔａｔｉｎｅｗｅｓｗｉｔｈａｂｏｕｔ３０ｋ７±２）ｌａｍｂｉｎｄａｓａｎｄ１～２ｆｅｔｕｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌ Ａ ｇｇ（ｇｙｙ
，ｒｏｕｓｏｆｌａｃｔａｔｉｎｅｗｅｓｗｅｒｅｆｅｄｗｉｔｈ０．４ｋａｎｄ０．６ｋｒｏｕｓａｎｄｔｈｒｅｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｈｒｅｅ ｇｐｇｇ０．５ｋｇｇｇｐ
，ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔａｃｃｏｒｄｉｎｔｏ８０％１００％ａｎｄ１２０％ｆｅｅｄｉｎｓｔａｎｄａｒｄｔｏｓｔｕｄｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｎｂｏｄ ｐｐｇｇｙｙ
，ｒｏｒａｍｉｅｌｄａｎｄｌａｍｂｗｅｉｈｔａｎｄｔｏｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃａｌｌｆｏｒｍｕｌａｔｅｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔｗｅｉｈｔｌａｃｔａｔｉｏｎ ｐｇｙｇｙｐｐｇ
：Ｗａｉｎｏｆｅｗｅｓｆｅｄｗｉｔｈ０．６ｋｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｆｏｒｌａｃｔａｔｉｎｅｗｅｓｏｆＱｉａｎｂｅｉｍａＧｏａｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓｅｉｈｔ ｇｇｇｇ
，）ｄＰ＜０．０ｓｕｌｅｍｅｎｔｉｓ１．３３ｋｅｒｉｏｄｂｕｔｗｅｉｈｔｌｏｓｓｏｆｅｗｅｓｆｅｄｗｉｔｈ０．５ｋ５ｕｒｉｎ０～３０ｄｔｅｓｔ ｐｐｇ（ｐｇｇｇ
（）ｅｒｉｏｄａｎｄ０．４ｋｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔｉｓ０．１５ｋａｎｄ２．３４ｋ５ｄｕｒｉｎ０～３０ｄｔｅｓｔ ｐｇｐｐｇｇＰ＜０．０ｇ
，）（ｎｒｅｓｅｃｔｉｖｅｌ．Ｔｈｅｒｅｉｓａｌｉｎｅａｒｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｓｕｌｅｍｅｎｔａｒｆｅｅｄａｍｏｕｎｔｙｋｄｅｗｅｗｅｉｈｔ ｇａｐｙｐｐｙｇ
２＊＊
）ａ（ｘ，ｋＲ＝０．７ｎ±１．６±３．２ｄｔｈｅｅｕａｔｉｏｎｉｓ０．２８５（９０）＋１９．７１２（３０）ｘ，（０， ｇｑｙ＝－１
）ＲＳｉｅｌｄＤ＝１．３０，Ｐ＝０．０００．Ｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔｌｅｖｅｌｈａｓｎｏｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔｓｏｎｌａｃｔａｔｉｏｎ ｙｐｐｇ
’ａｎｄｌａｍｂｗｅｉｈｔａｆｔｅｒ１５ｄａｎｄ３０ｄｓｕｌｅｍｅｎｔａｒｆｅｅｄｉｎ．Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔａｒｃａｎｄｅｃｒｅａｓｅｅｗｅ ｇｐｐｙｇｐｐｙ
／ｓｗｅｉｈｔｌｏｓｓ．Ｔｈｅｏｔｉｍｕｍｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔａｒａｍｏｕｎｔｉｓ０．５２ｋｅｗｅｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｃｏａｒｓｅｆｏｄｄｅｒ ｇｐｐｐｙｇ
（／）（／）ｅｉｈｔｉｎｃｌｕｄｉｎｒｅｅｎｍａｉｚｅ２．３ｋｅｗｅａｎｄｓｏｒｈｕｍｈｕｓｋ０．１ｋｅｗｅａｃｃｏｒｄｉｎｔｏｔｈｅｎｏ－ｗ ｇｇｇｇｄｇｇｄｇ
ｌｏｓｓｓｔａｎｄａｒｄ．
：Ｑ；ｗ；ｗ；；；ＫｅｗｏｒｄｓｉａｎｂｅｉｍａＧｏａｔｅｉｈｔｅｉｈｔｌｏｓｓｌａｃｔａｔｉｏｎｉｅｌｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔｒｏｄｕｃ－ ｇｇｙｐｐｐｙ
ｔｉｏｎｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｐ 黔北麻羊是贵州省优良地方山羊品种，具有适应山区粗放饲养、抗病力强、产肉性能好、繁殖率高等优点。但存在母羊繁殖率低、羔羊存活率低、病死率高（０％）等问题，严重制约了黔北２０％～４
麻羊养殖业甚至贵州省草地生态畜牧业的发展。
营养是影响羊只生长、泌乳的主要因素之一。有研究表明，补饲精料可以促进羊只泌乳、减少母
］１８－
。春季放牧条件体失重和提高哺乳羔羊的增重［
下对泌乳母羊进行补饲，有利于夏季放牧期的体重
１］
；妊娠后期和泌乳期补饲高水平蛋白质均可恢复［
提高母羊日增重，同时促进母羊泌乳，增加羔羊初
］３２－
。但有关黔北麻羊特别是生重、提高羔羊增重［
泌乳母羊营养的研究却非常缺乏，导致黔北麻羊生
产无据可依，大多凭经验饲养，生产水平低下。为科学制定黔北麻羊泌乳母羊的补饲方案，亦为其营养需要研究奠定基础，笔者于２１４年８月１日至０９月１５日在贵州省习水县黔北麻羊原种场，进行了精料补饲水平对泌乳母羊的饲养效果试验。
１
材料与方法
１．１黔北麻羊及日粮
）ｄ，黔北麻羊泌乳母羊１２１２８只，产羔（７±～【黔北麻羊】
。参照《胎次，平均体重约为３肉羊饲养标准》０ｋｇ
）山羊泌乳前期营养需要，结合习（／８１６－２００４ＮＹＴ
；收稿日期］ ２０６０９２０８０１修回１５０１５０ ［－－－－
）３］；贵州省农业厅科技计划项目基金项目］ 贵州省科技计划项目“黔北麻羊选育及健康养殖关键技术研究”［黔科合ＮＹ（０１４０４６２ ［
“黔北麻羊饲养标准制定”
，男，在读本科，专业：动物科学。Ｅ－ｍ：作者简介］ 陈 扬（ａ９０－）ｉｌ７０３２６７１４９＠ｑ．ｃｏｍ９１ ［ｑ），，：：（，，。通讯作者女副教授施晓丽博士动物营养与饲料科学ｍａ７１－ｉｌｓｈｉｘｌ１６１６３．ｃｏｍ１９Ｅ－ ＊＠
陈 扬等 精料补饲对黔北麻羊泌乳母羊生产性能的影响
Ｎ ＹａｎｅｔａｌｆｆｅｃｔｓｏｆＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｅＳｕｌｅｍｅｎｔｏｎＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆＬａｃｔａｔｉｎＥｗｅｓｏｆＱｉａｎｂｅｉｍａＧｏａｔ ＣＨＥ Ｅ ｇｐｐｇ
·１６９·
表１试验黔北麻羊泌乳母羊的日粮组成及营养水平ｅｗｅｓｏｆＱｉａｎｂｅｉｍａＧｏａｔ
补饲水平
１．３指标测定
Ｔａｂｌｅ１ Ｒａｔｉｏｎｃｏｍｏｓｉｔｉｏｎａｎｄｎｕｔｒｉｅｎｔｌｅｖｅｌｏｆｌａｃｔａｔｉｎ ｐｇ
正试期开始对母羊及对应的羔羊空腹称重，补、３饲１０ｄ再各称重１次，并计算体重变化。采５ｄ、用吸吮－称重－吸吮的方式测定母羊正试期１ｄ
［］
５ｄ和３０ｄ的泌乳量８。１
日粮Ｒｔｉｏｎａ
名称Ｎａｍｅ
ｅＣｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｍｅｎｔａｔｉｏｎｌ ｐｐ
８０％１００％１２０％
（）（）（）０．４ｋ０．５ｋ０．６ｋｇｇｇ
组成青饲玉米０００ｋ２．３ ２．３ ２．３ｇ
／高粱壳０００ｋ０．１ｏｍｏｓｉｔｉｏｎ ０．１ ０．１ Ｃｇｐ 精料／ｋ０．４０００ ０．５ ０．６ｇ 合计０００ ２．９ ３．０／２．８干物质采食量／（ｋｇ
营养水平０．８６６４ ０．９ １．０
）／（／）ｄ代谢能Ｎｕｔｒｉｅｎｔｌｅｖｅｌ．２０９．３９１０．４４ＭＪｄ８
／）粗蛋白／（０．３３１３０．４４１４８．１４ｄ１１ ｇ／）钙／（ｄ４．３９７６ ５．１ ５．８ｇ／）磷／（ｄ３．０７１９ ３．５ ３．８ｇ／）食盐／（６５５ｄ２．７３．４４．１１．４
统计分析
采用ＳＳＳ１８．０统计软件的一般线性Ｐ
（ｎｉｖａｒｉａｔｅ进行单因素协方差分ＧＬＭ）过程，用Ｕ析，Ｄｎｃａｎ法进行多重比较，ＬｎｅａｒＲｅｒｅｓｓｉｏｎｕｉ ｇ进行线性回归分析。结果用平均值±标准误表示。
２
结果与分析
水黔北麻羊原种场的饲草设计基础日粮。
１．２饲养管理
将１８只黔北麻羊泌乳母羊随机分为３组，群饲于漏缝羊舍，精料补充料采食水平分别为肉羊饲养标准的８％、１００％和１２０％，即每天精料投喂量分０
／（）／（）和０、别为０只·ｄ只·ｄ．４ｋ５ｋ．６０．ｇｇ
／（），青粗料喂量相同（），日喂料２次只·ｄ表１ｋｇ
：），自由饮水。预试期１，正试期（：，７００９００１５ｄ
。其他饲养管理按羊场常规进行。３０ｄ
表２
２．１母羊体重
由于母羊起始体重不一致，经回归分析，初始体重与各阶段体重及增重间均存在线性关系
），满足协方差分析条件。以母羊初始体重（Ｐ＜０．０５
，进为协变量，初始体重的修正均数为３．６４８９ｋ１ ｇ
行协方差分析。从表２看出，母羊分别采食精料的
、％、１００％和１２０％，０～１５ｄ分别失重２７ｋ８０．１ｇ
；１和增重１３ｋ６～３０ｄ时分别失重０．５２ｋ．２ｇｇ
、增重０；整个试验期分１８ｋ．３８ｋ．１ｋ０．ｇｇ和０ｇ
、。别失重２３４ｋ０．１５ｋ３３ｋ．．ｇｇ和增重１ｇ
不同精料补饲水平黔北麻羊泌乳母羊的体重及其协方差分析
ｌｅｖｅｌａｎｄｅｗｅｓｏｆＱｉａｎｂｅｉｍａＧｏａｔｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔａｒａｂｌｅ２ Ｗｅｉｈｔｏｆｌａｃｔａｔｉｎ Ｔ ｐｐｙｇｇ
／ｅｗｅｃｏｖａｒｉａｎｃｅａｎａｌｓｉｓｋ ｙｇ
指标Ｉｎｄｅｘｅｓ
Ｉｉｔｉａｌｗｅｉｎｈｔ ｇ
１５ｄ体重
ｗｅｉｈｔａｆｔｅｒ１５ｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔｏｄ Ｂｙｇｐｐ
３０ｄ体重
ｗｅｉｈｔａｆｔｅｒ３０ｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔｏｄ Ｂｇｐｐｙ
０～１５ｄ体重增减
ｏｄｗｅｉｈｔａｉｎａｆｔｅｒ０～１５ｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔ Ｂｇｇｐｐｙ １６～３０ｄ体重增减
ｗｅｉｈｔａｉｎａｆｔｅｒ１６～３０ｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔｏｄ Ｂ ｇｇｐｐｙ
体重增减０～３０ｄ０％８
补饲水平
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｍｅｎｔａｔｉｏｎｌｅ ｐｐ
１００％
１２０％２７．５６±０．４０ｂ
２７．９７±０．５３（）３２．８８±０．４７ａ２９．０５±０．５３（）３２．９８±０．６６ａ０．４１±０．３７（）１．２３±０．４８ａ１．０９±０．４６（）０．１０±０．５６ａ１．５０±０．５４
）（４．７±１．４７ａ３５．１４±１．３５ａ３
３２．９９±１．８６３５．３１±１．６２ （）（）２９．３２±０．４６ｂ３１．１３±０．４８ａ３２．０１±１．５５３４．８５±１．３７ （）（）２９．０７±０．６５ｂ３１．５０±０．６９ａ－１．５６±０．４２０．１８±０．３６ （）（）－２．１７±０．４７ｂ－０．５２±０．５０ａ－０．９１±０．４９－０．４７±０．３２ （）（）－０．１８±０．５５ａ０．３８±０．５８ａ－２．４７±０．４４－０．２９±０．１２ （）（）１．６４８９ｋ 注：以初始体重的修正均数３ ｇ进行修正，括号内数字为修正后的均数±标准误；同行不同字母表示修正均值间差异显著
）。（Ｐ＜０．０５：ｏｔｅＴｈｅａｄｕｓｔｅｄｍｅａｎｆｏｒｉｎｉｔｉａｌｗｅｉｈｔｉｓ３１．６４８９ｋ．Ｔｈｅｄｉｉｔｉｎｂｒａｃｋｅｔｓｉｓｒｅｖｉｓｅｄｍｅａｎ±ＳＤ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｅｔｔｅｒｓａｎｄｔｈｅｓａｍｅｌｅｔｔｅｒｓ Ｎｊｇｇｇｓｉｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｔ０．０５ｌｅｖｅｌｒｅｓｅｃｔｉｖｅｌ．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏ
ｗ．ｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｎｉｆｉｃａｎｃｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅａｔ０．０５ｌｅｖｅｌａｎｄｎｏｎ－ ｇｐｙｇ
从图看出，精料采食量（ｙ）与母羊体重变化
＊
（（ｘ）间存在线性关系，ｙ＝－１±１．０．２８５
＊
（）＋１６Ｒ２＝０．７±３．２９０９．７１２３０）ｘ（０，）。表明，随精料补饲量ＲＳＤ＝１．３０，Ｐ＝０．０００
增加，母羊失重减少。经计算，当精料采食量为【黔北麻羊】
２ｋ０．５ｇ时可避免母羊失重。
图示【黔北麻羊】
不同精料补饲水平黔北麻羊泌乳母羊体重变化
的线性回归
ｉ． Ｌｉｎｅａｒｒｅｒｅｓｓｉｏｎｏｆｗｅｉｈｔｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｌａｃｔａｔｉｎ Ｆ ｇｇｇｇ
ｅｗｅｓｏｆＱｉａｎｂｅｉｍａＧｏａｔｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔｌｅｖｅｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔ ｐｐｓｕｌｅｍｅｎｔａｒｌｅｖｅｌｐｐｙ
２．２母羊泌乳量
从表３看出，第１天泌乳量间存在显著差异，经回归分析，第１天泌乳量与１０ｄ间均存在５ｄ和３
线性关系，满足协方差分析条件。以正试期第１天泌
贵州农业科学
·１ｕｉｚｈｏｕＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ７０· Ｇ ｇ
表３
不同精料补饲水平黔北麻羊泌乳母羊的泌乳量及其协方差分析
乳量为协变量，经方差分析，精料补饲水平对黔北、３麻羊泌乳母羊１０ｄ的泌乳量均无显著影响。５ｄ２．３
羔羊体重
从表４看出，羔羊初始体重间存在显著差异，回归分析表明，第１天羔羊体重与１０ｄ间５ｄ和３存在线性关系，满足协方差分析条件。以羔羊初始体重为协变量，经方差分析，黔北麻羊泌乳母羊补、３饲不同精料水平后１０ｄ羔羊的体重及日增５ｄ重均无显著差异。
Ｔａｂｌｅ３ ＬａｃｔａｔｉｏｎｉｅｌｄｏｆｌａｃｔａｔｉｎｅｗｅｓｏｆＱｉａｎｂｅｉｍａＧｏａｔ ｙｇ
ｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅｓｕｌｅｍｅｎｔａｒｌｅｖｅｌａｎｄ ｐｐｙ
／ｃｏｖａｒｉａｎｃｅａｎａｌｓｉｓｋｄ ｙｇ
时间／ｄＴｉｍｅ１
１５ ３０
补饲水平Ｓｕｍｅｎｔｌｅｖｅｌｌｅ ｐｐ
１００％１２０％８０％
２±０．０８ａ０．８９±０．１５ａ０．７２±０．０８ｂ０．９０．９０±０．１０５±０．１２９±０．０７ ０．８ ０．６（）（）（）０．８２±０．０１ａ０．７９±０．０１ａ０．７８±０．０１ａ０．８６±０．０５４±０．１４９±０．０７ ０．８ ０．６
（）（）（）０．７９±０．０１ａ０．７８±０．０１ａ０．７８±０．０１ａ
２１１ｋ 注：以第１天泌乳量的修正均数０．８ ｇ进行修正。
：Ｔｔｅｈｅａｄｕｓｔｅｄｍｅａｎｆｏｒｌａｃｔａｔｉｏｎｉｅｌｄｏｎｆｉｒｓｔｄａｉｓ０．８２１１ｋ．ｏ Ｎｊｙｙｇ
表４黔北麻羊泌乳母羊补饲不同精料水平后羔羊的体重及日增重
ｂｌｅ４ ＬａｍｂｗｅｉｈｔａｎｄｄａｉｌａｉｎｏｆｌａｃｔａｔｉｎｅｗｅｓｏｆＱｉａｎｂｅｉｍａＧｏａｔｕｎｄｅｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅａ Ｔｇｙｇｇ
ｓｕｌｅｍｅｎｔｌｅｖｅｌ ｐｐ
指标Ｉｎｄｅｘｅｓ
ｋｇ
ｅｉｈｔ Ｗ ｇ
时间／ｄＴｉｍｅ
１ １５ ３０
日增重／ｇ
ａｉｌａｉｎ Ｄｙｇ
０～１５ １６～３０ ０～３０
８９６ｋ 注：以第１天体重的修正均数３．３ｇ进行修正。
：ｉｓ３．３８９６ｋ．ｔｅＴｈｅａｄｕｓｔｅｄｍｅａｎｆｏｒｗｅｉｈｔｏｎｔｈｅｆｉｒｓｔｄａｏ Ｎｇｊｇｙ
补饲水平Ｓｌｅｕｍｅｎｔｌｅｖｅｌ ｐｐ
８０％
８±１．０５ａ４．２５．３６±１．３９ （）４．３１±０．２７ａ６．８１±１．９０ （）５．５１０±０．３８ａ６．７１±２９．２８７ （）６５．８９±１９．０１ａ１０３．８６±４６．３５ａ（）８５．５７±１６．４４ａ９０．２９±３６．３９ａ１００％
３．２３±０．８７ｂ４．０４±１．１５ （）４．２３±０．１８ａ５．０５±１．５６ （）５．２８±０．２５ａ５８．２５±２３．７４ （）６０．２０±１２．５３ａ７１．８３±４１．１９ａ（）７５．１２±１０．８４ａ６５．０４±２７．３６ａ１２０％
３．０９±０．５６ｂ４．０２±０．７６（）４．３８±０．１７ａ５．００±０．７５（）５．４４±０．２４ａ６６．７１±４９．２０（）７０．３７±１２．１８ａ６９．８６±２１．４６ａ（）７６．０４±１０．５４ａ６８．２８±２５．８９ａ３
结论与讨论
试验结果表明，黔北麻羊泌乳母羊每天补饲精料
／只，所有母羊均出现失重，３０．４ｋ０ｄ失重ｇ
／只，且母羊体况差，表明８２．３４ｋ％补饲水平不０ｇ
［］１
能满足羊只泌乳的需要。与解进等对呼伦贝尔泌乳羊的补饲研究结果一致。随着精料补饲量增加，母羊
／只时３／只，失重减少，补饲０５ｋ０ｄ失重０．１５ｋ．ｇｇ
其中出现失重的羊只主要为双羔母羊，单羔母羊体重
／只时，平均增重１增加。当精料增加至０６ｋ３３．．ｇ
／只，其中双羔母羊亦出现失重，但其失重较补饲ｋｇ
／只和０／只的低。泌乳母羊０～１５ｋ．４ｋ０．５ｄ的ｇｇ
，这可能与０～１失重高于１即产羔后２０ｄ６３５ｄ（２～
）是母羊泌乳高峰有关。一般母羊产奶高峰是７ｄ３～
产羔后３０ｄ左右，在泌乳高峰时摄入养分难以满足其泌乳需求，因此动用母体营养以满足泌乳需要，所以采食精料０４ｋ．５ｋ．１５ｄ时出现～ｇ和０ｇ的母羊在０
产羔后３失重，精料喂量越低失重越多。０ｄ（１６３８～
［２
）时，母羊泌奶降低，失重减少，与解进等］３ｄ５～
对呼伦贝尔泌乳羊的补饲研究，即在补饲２个月时补饲母羊体重开始回升，并高于补饲开始的结果一致。补饲１５ｄ后，不同精料水平对黔北麻羊泌乳母羊泌乳量、对应羔羊体重没有显著影响，可能是泌乳量差异不大而导致羔羊体重的差异不显著。
补饲精料可减少黔北麻羊７～５２ｄ泌乳期的失重，且失重与精料采食量存在线性关系，当精料采食量不低于０．５２ｋｇ时可避免母羊失重。为减少
／（或避免母羊失重，在以青饲玉米［ｄ·２．３ｋｇ
／（］为青粗料、高粱壳［］为只）ｄ·只）０．１ｋｇ
／粗饲料的基础上，精料补充料不能少于０．５２ｋｇ
（·只）。ｄ
［参［１］［２］［３］［４］［５］［６］［７］
考
文
献］
解进，闫素梅，李疆，等．呼伦贝尔泌乳母羊
］春季放牧补饲对羔羊生长和母羊体重的影响［Ｊ．
，（）：，饲料工业２４６．１４３５１１４３０－
安清聪，金显栋，陈育枝，等．不同蛋白质水平日
］粮对云岭黑山羊泌乳期生产性能的影响［Ｊ．中国
）：１畜牧兽医，２００８，３５（５３７８．１３－
牛峰．休牧期补饲不同营养水平日粮对阿尔巴斯型白绒山羊体重变化以及营养物质消化率的影响［０１２．Ｄ］．呼和浩特：内蒙古农业大学，２
李歆．日粮不同能量和蛋白水平在西农萨能奶山羊泌乳性能和乳成分的影响［Ｄ］．杨凌：西北农林科技大学，２０１２．白成斌．１～９０ｄ关中奶山羊能量需要研究［Ｄ］．杨凌：西北农林科技大学，２０１０．
王成东．放牧补饲和体牧舍饲对绒山羊生产性能及营养物质消化的影响［Ｄ］．呼和浩特：内蒙古农
，业大学２０１３．，ＤｏｖｅＨＭｉｌｎｅＪＡ，ＬａｍｂＣＳ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｉｎｆｌｕ－ ｃｅｏｆｈｅｒｂａｅｍａｓｓａｎｄｓｕｌｅｍｅｎｔａｒｆｅｅｄｉｎｏｎｅｎ ｇ ｐｐｙｇ
，ｎｕｔｒｉｅｎｔｆｌｏｗｓａｎｄａｎｉｍａｌｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｉｎｒａｚｉｎ ｐｇｇ
］，２ｌａｃｔａｔｉｎｅｗｅｓ［Ｊ．ＪＡｒｉＳｃｉ０１２，１５０：６４４－ ｇｇ
６６２．
，ＤＦｌｏｒｅｓＭＪｅｌａｄｌｌｏＪＡ，ＦｌｏｒｅｓＪＡ，ｅｔａｌ．Ａｒｔｉ－ ｇ
ｆｉｃｉａｌｌｏｎｄａｓｉｎｃｒｅａｓｅｍｉｌｋｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎｓｕｂｔｒｏｉ ｇ ｐｐ－ ｙ ｌｌａｃｔａｔｉｎｏａｔｓｍａｎａｅｄｕｎｄｅｒｅｘｔｅｎｓｉｖｅｒａｚｉｎｃａ ｇｇｇｇｇ
［］，，：３４２．ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓＪ．ＪＡｒｉＳｃｉ２０１５１５３３３５－ ｇ
（责任编辑：冯 卫）
［８］
56
HeilongjiangAnimalScience andVeterinaryMedicine
#122010
黔北麻羊GDF9基因多态性与产羔
性能关系的研究
罗卫星,史忠辉,刘贞德,蔡惠芬,刘若余,罗 祥
1
2
2
1
1
1
(1.贵州大学动物科学学院高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室,贵州
贵阳550025;2.遵义市农业委员会,贵州遵义563000)中图分类号:S826.2
文献标识码:B
文章编号:1004-7034(2010)12-0056-03
关键词:黔北麻羊;GDF9基因;遗传多态性;产羔数
摘 要:为了研究黔北麻羊GDF9基因多态性与产羔性能的关系,试验采用直接测序的方法对黔北麻羊的生长分化因子9(GDF9)基因外显子2核苷酸多态性及其与产羔数的关系进行了分析。结果表明:在黔北麻羊群体GDF9基因外显子2的959bp处存在A C的碱基突变,导致所编码的氨基酸由谷氨酰氨(Gln)突变为脯氨酸(Pro)。通过最小二乘法分析SNPs及其与产羔数的关联,结果表明:该突变对黔北麻羊平均产羔数有极显著影响(P<0.01),平均产羔数在所检测到的2种基因型中呈现出AC>AA,AC基因型比AA基因型平均产羔数多0.85只,突变杂合子个体产羔数极显著增加(P<0.01)。
山羊的繁殖性状和经济发育性能比较特殊,窝产仔数远低于猪。自1980年Davis通过分离分析假设在绵羊BooroolaMerino中存在Booroola基因(亦称FecB基因),开始了绵羊高排卵率与有关基因(突变)关系的研究。目前,对绵羊多胎基因研究较多,
IHGBH
相继发现了FecX、FecX、FecX、FecX、FecG等基
[1]
因突变,并对一些突变基因进行了定位和克隆。GDF9(生长分化因子9)属于转化生长因子 (TGF )超家族成员,对早期卵泡的生长和分化起重
[2]
要调节作用,直接影响动物的产仔数。HanrahanP
[3]
J等发现5号染色体上GDF9基因的编码区1184bp处的碱基突变C T(称为G8突变)与高繁殖力绵羊品种Belclare和Cambridge杂合携带母羊的高排卵数和纯合子不育相关联。GDF9被认为是绵羊高繁殖力的主效基因。目前,在绵羊上对GDF9基因的研究很多,而在山羊上研究相对较少。研究者们
H[4-6]
在绵羊品种中检测到了GDF9的FecG突变,目
H
前在山羊品种中还未发现GDF9的FecG突[1,7-8]变。说明GDF9基因作为绵羊高繁殖力主效基因之一,在不同品种间存在遗传差异。试验以黔北麻羊为研究对象,以GDF9基因作为产羔数候选基因进行研究,为黔北麻羊的选育和保种提供科学的理论
收稿日期:2010-07-05;修回日期:2010-08-02
基金项目:贵州省农业科技攻关项目(黔科合NY字[2008]3044)
,依据。
1 材料与方法1.1 材料
试验羊30只,为发育正常的经产黔北麻羊母羊,均采自贵州省习水县温水镇目里村黔北麻羊保种区。每只羊通过颈静脉采集血液5mL,装在真空采血管中,快速振荡混匀,放入冰盒,带回实验室-40 保存,备用。1.2 方法1.2.1 DNA提取 采用DNA提取试剂盒[天根生化科技(北京)有限公司]抽提基因组DNA,-20 保存,备用。1.2.2 引物设计与合成 根据GenBank发表的山羊GDF9基因(登录号为EF446168),采用Primer5.0软件自行设计引物,扩增GDF9基因第2外显子长度约为776bp的片段,引物由上海英骏生物技术有限公司合成。引物序列为F5!-GGCATTACTGTTG GATTGTTTTTC-3!,R5!-CAGTATCGAGGGTTG TATTTGTGT-3!。1.2.3 PCR扩增 PCR反应体系:10pmol/ L上、下游引物各2 L,2∀TaqPCRMasterMix试剂[天根生化科技(北京)有限公司]25 L,DNA模板4 L,加纯化水至50 L。PCR反应条件:95 预变性5min;94 变性1min,59 退火1min,72 延伸1min,共35个循环;72 再延伸7min,4 保存。1
%黑龙江畜牧兽医&科技版
2010年12月(上)57
2.3 GDF9基因的基因频率和基因型频率
根据测序峰图进行基因型判定,统计不同基因型,并计算基因频率与基因型频率(见表1)。
表1 GDF9基因在黔北麻羊中的等位基因
频率和基因型频率
样本数/
n30
AA
基因型频率/%
AC
CC0.0000(0)
A0.8334
基因频率/%
C0.1667
1.2.4 目的DNA序列测定 检测后的PCR产物送
上海生工生物工程技术服务有限公司进行测序。1.3 数据处理
将测得的DNA序列用DNAStar软件中的Seq Man程序排列同源序列,并进行人工校正,根据测序峰图和杂合子峰型确定SNPs;用POPGENE1.31计算基因频率、基因型频率;群体遗传纯合度、杂合度、有效等位基因数和多态信息含量的计算方法参照文
2
献[9];用SPSS16.0软件进行X适合性检验程序检测是否处于Hardy-Weinberg平衡状态及对产羔数进行最小二乘方差分析。2 结果与分析2.1 PCR扩增结果
经过35个循环的PCR扩增后,取PCR产物2 L进行琼脂糖凝胶电泳分析,在用EB染色后的凝胶上出现长度约为776bp的单一条带(见图1),扩增片段与目的片段大小一致,
特异性良好。
0.6667(20)0.3333(10)
由表1可知:在黔北麻羊群体中GDF9基因呈偏态分布,AA纯合型的分布频率远高于AC杂合型,故A等位基因为绝对优势基因。2.4 GDF9基因的群体遗传特性分析
黔北麻羊GDF9基因的纯合度(Ho)、杂合度(He)、有效等位基因数(E)、多态信息含量(PIC)及2
X检验结果见表2。
表2 GDF9基因的纯合度、杂合度、有效等位
2
基因数、多态信息含量及X检验结果
品种黔北麻羊
纯合度
杂合度
有效等位基因数1.3845
01(
多态信息含量0.258
X
2
0.72230.2777
05
1.1996
注:df=2, 20.(2)=5.99, 20.
2)=9.21;PIC>0.5为高度多
态,0.25<PIC<0.5为中度多态,PIC<0.25为低度多态。
M.Marker;1~9.9个不同黔北麻羊个体。
图1 GDF9基因PCR扩增结果
2.2 测序结果分析
测序结果显示,利用试验自行设计的引物得到的GDF9基因片段长度为776bp,含有部分内含子1和外显子2。与参考序列(EF446168)相比,在外显子2的959bp处发生了A C突变(见图2),将其命名为GDF9-exon2-A959C。碱基的突变使得密码子由CAG变为CCG,导致氨基酸由谷氨酰胺(Gln)突变为脯氨酸(Pro)。将外显子2第959位的碱基为A时的纯合个体命名为AA型,而将在该处的碱基为C时的纯合个体命名为CC型,杂合型命名为AC型。故在黔北麻羊群体中只检测到AA、AC2种基因型,没有检测到CC
纯合型。
由表2可知:黔北麻羊在GDF9-exon2-A959C位点纯合度较高为0.7223;从多态信息含量方面来
2
看,黔北麻羊处于中度多态;经X适合性检验表明,黔北麻羊GDF9基因型频率符合期望比例,即黔北麻羊群体在GDF9-exon2-A959C位点处于Hardy-Weinberg平衡状态。2.5 GDF9基因多态性与黔北麻羊母羊产羔数的关系
GDF9基因不同基因型的30只黔北麻羊母羊产羔数的最小二乘均值及标准误见表3。
表3 GDF9基因不同基因型的黔北麻羊母羊产羔数的
最小二乘均值及标准误
基因型AA
AC
样本数2010
最小二乘均值及标准误1.9500∃0.18462.8000∃0.1333
只
图2 黔北麻羊GDF9基因在第2外显子959bp
处发生的碱基突变
由表3可知:产羔数在3个基因型之间呈现出AC>AA。C等位基因对黔北麻羊产羔数有极显著影响(P<0.01)。3 讨论3.1 GDF9基因在黔北麻羊群体中的遗传特性分析
GDF9基因被认为是绵羊高繁殖力的主效基因,,1
58
碱基突变即FecG突变是介导GDF9与∋型受体结
H
合的关键氨基酸之一,FecG突变导致杂合的Bel clare和Cambridge母羊的排卵数分别增加1.79个和
[3]
2.35个,在我国的高产绵羊品种(湖羊)中检测存
H[4]
在GDF9的FecG突变,而在济宁青山羊中没有检
[7][10]
测到G8突变。李碧侠等在小尾寒羊、湖羊、陶赛特和萨福克绵羊中发现了GDF9基因第1外显子cDNA第152bp处发生了单碱基的改变(A G转换),并导致了氨基酸的改变(天冬酰胺 天冬氨
[5]
酸)。杨晶研究表明,小尾寒羊GDF9基因外显子2中检测到2处碱基突变(477位G A和729位G T),第729位碱基突变导致243位氨基酸由谷氨酰胺
[11]
变为组氨酸。艾君涛在海门山羊、黄淮山羊和波
H
淮杂交二代群体中没有检测出GDF9的FecG基因
[1]
多态性。董传河对济宁青山羊GDF9基因外显子突变位点进行检测,结果发现在山羊GDF9编码序列第183bp、719bp、959bp、1189bp处分别发生了C A、C T、A C、G A的单碱基突变。
研究在黔北麻羊的GDF9基因外显子2中检测到1处碱基突变。检测结果表明:在黔北麻羊GDF9基因第2外显子的959bp处有1个A C的单碱基突变,碱基突变导致谷氨酰胺突变为脯氨酸,这与董
[1]
传河的研究结果一致。在黔北麻羊中检测到野生纯合基因型(AA)、突变杂合基因型(AC),无突变纯合基因型(CC)。产生这种结果的原因可能是黔北麻羊中突变纯合子死亡,比如在胚胎期死亡或在到达繁殖年龄之前死亡;或者可能是由于群体抽样的原因导致数量较少的纯合突变个体未进入样本群。3.2 GDF9基因突变与产羔性状的关系
[3]
HanrahanPJ等发现,GDF9基因的G8突变与高繁殖力绵羊品种Belclare和Cambridge杂合携带母
[6]
羊的高排卵数和纯合子不育相关联。畅静桃的研究结果表明,GDF9基因座AB基因型和BB基因型小尾寒羊平均产羔数分别比AA基因型多0.181只(P>0.05)和0.626只(P>0.05)。此外,李碧侠[10][12][5]等、ChuMX等、杨晶的研究发现,GDF9基因不同基因型对小尾寒羊有显著影响(P<0.05);但
[13]
陈勇等的研究表明,GDF9基因的G4突变对绵羊
[14]
平均产羔数无显著影响(P>0.05)。吴泽辉的研究表明,济宁青山羊AA、AB型产羔数分别比BB型多1.04只(P<0.01)和0.75只(P<0.01),AA型比AB基因型产羔数多0.29只(P>0.05)。周泽晓[15]
等的研究表明,GDF9基因1007(C/T)位点的多态性与贵州白山羊产羔数之间没有直接的相关性。
H
[1]
HeilongjiangAnimalScience andVeterinaryMedicine
#122010
董传河的研究表明,A959C突变对济宁青山羊和鲁北白羊、沂蒙黑山羊的产羔数均没有极显著影响(P>0.05),而本研究表明A959C突变对黔北麻羊平均产羔数有极显著影响,表现为AC杂合型比AA纯合型平均产羔数多0.85只,表明C等位基因对黔北麻羊产羔数有极显著影响(P<0.01),这与先前的研究不同。这提示GDF9基因在不同品种间遗传物质存在较大的差异,不同品种羊繁殖力机制可能存在较大的差异。此次试验结果表明GDF9基因A959C位点的C等位基因可以作为黔北麻羊高产羔率的标记,但其影响机制还有待进一步研究。参考文献:
[1] 董传河.济宁青山羊多胎性状候选基因研究[D].北京:北京畜
牧兽医研究所,2008.
[2] 储明星,桑林华,王金玉,等.小尾寒羊高繁殖力候选基因
BMP15和GDF9的研究[J].遗传学报,2005,32(1):38-45.[3] HANRAHANPJ,GREGANSM,MULSANTP,etal.Mutationsin
thegenesforcyte-derivedgrowthfactorsGDF9andBMP15areas sociatedwithbothincreasedovulationrateandsterilityinCambridgeandBelclaresheep(Ovisaries)[J].BiolReprod,2004,70(4):900-909.
[4] 管峰,艾君涛,庞训胜,等.绵羊GDF9和BMP15基因多态性检
测[J].生命科学研究,2005,9(2):184-188.
[5] 杨晶.小尾寒羊GDF9基因和BMP15基因多态性及其与高繁殖
力关系的研究[D].北京:中国农业科学院,2006.
[6] 畅静桃.GDF9基因多态性及其与小尾寒羊多羔性关系的研究
[D].兰州:甘肃农业大学,2008.
[7] 何远清,储明星,王金玉,等.6个山羊品种高繁殖力候选基因
BMP15多态性研究[J].安徽农业大学学报,2006,33:61-64.[8] 杜智勇,林尖兵.贵州白山羊GDF9基因外显子2的多态性研究
[J].繁殖育种,2008,40(4):46-48.
[9] 刘桂琼,曹勤忠,姜勋平,等.小梅山猪FSH基因多态性与繁殖
性状的关联研究[J].中国畜牧杂志,2004,40(12):6-8.[10]李碧侠,储明星,王金玉,等.绵羊GDF9基因PCR-SSCP分析
[J].遗传学报,2003,30(4):307-310.
[11]艾君涛.山羊繁殖和生长性状的分子遗传多样性研究及关联分
析[D].南京:南京农业大学,2005.
[12]CHUMX,LIBX,WANGJY,eta.lAssociationbetweenPCR-SS
CPofgrowthdifferentiationfactor9geneandhighprolificacyinsmalltailedhansheep[J].AnimalBiotechnology,2004,15:111-120.[13]陈勇,雒秋江,张亚军,等.绵羊BMP15和GDF9基因多态性与
产羔性能间的关系[J].新疆农业大学学报,2009,32(5):10-17.
[14]吴泽辉.生长分化因子9基因多态性与济宁青山羊高繁殖力关
系的研究[D].北京:中国农业科学院畜牧研究所,2005.[15]周泽晓,冉雪琴,王嘉褔.贵州白山羊GDF9基因编码区1007位
点的多态性[J].中国畜牧兽医,2009,36(12):74-78.
(015)
《黑龙江畜牧兽医》科技版2015年08月（上）97
贵州地方山羊GnＲHＲ基因多态性研究
张劲松1，龙威海2，许厚强2，冯文武2，陈
祥2
（1．习水县农牧局，贵州遵义564600；2．贵州大学动物科学学院/高原山地动物遗传育种与
繁殖教育部重点实验室/贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室，贵阳550025）中图分类号：S827；Q786
文献标识码：B
文章编号：1004－7034（2015）08－0097－04
关键词：促性腺激素释放激素受体（GnＲHＲ）基因；单核苷酸多态性（SNP）；外显子；贵州地方山羊；多
态性
摘要：为了分析山羊GnＲHＲ基因外显子区序列的多态性，筛选出对山羊繁殖性状有显著影响的单核苷酸多态性（SNP）位点，试验以贵州白山羊、黔北麻羊和贵州黑山羊3个地方品种为研究对象，采用DNA池结合PCＲ直接测序法对GnＲHＲ基因进行SNP检测，同时结合在线软件预测不同基因型mＲNA的二级结构。结果表明：在3个山羊品种中共检测到2个SNP位点，即G121A、G15A，其中G121A位于外显子1中且为同义突变，G15A位于内含子中。对外显子1G121ASNP位点进行生物信息学分析显示，其导致mＲNA二级结构发生改变。
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2015.1369
繁殖性状是家畜的重要经济性状，由于繁殖性状的遗传力很低，采用常规的育种技术改良产仔数性状，其选育进展缓慢。繁殖性状中的排卵数和窝产仔数是决定繁殖率的关键因素，产仔数的高低受许多因素影响，排卵数则是其中重要的影响因素之一，而排卵率与产仔率之间有着较高的遗传相关。由于排卵是受垂体性腺轴调控的，因此参与垂体性腺轴调控的各类激素都有可能影响产仔数。随着分子生物学技术和现代繁育理论的不断发展和渗透，从基因水平对家畜高繁殖力机制进行探讨已取得许多成就，而找到与这些繁殖性状位点相连锁的分子遗传标记则是实现标记辅助选择的先决条件。
促性腺激素释放激素（gonadotropinreleasinghor-mone，GnＲH）是由丘脑下部神经内分泌细胞合成的一种十肽，是下丘脑－垂体－性腺轴的关键神经内分泌调节因子，GnＲH作用的发挥依赖于促性腺激素释放激素受体（GnＲHＲ）的存在［1］。G．W．Montgomery
等［2］通过研究将绵羊的GnＲHＲ基因定位到6号染色体上。对绵羊的GnＲHＲ基因进行研究发现，该基因存在一个单拷贝，在编码区有很高的序列同源性［3］。GnＲHＲ基因由2个内含子和3个外显子组成，外显子1编码GnＲHＲ蛋白的N－端尾巴及跨膜（TM）单环1，2，3和部分TM4，外显子2编码剩余部分TM4及整个TM5，而外显子3编码TM6和TM7。
哺乳动物的排卵依赖于促黄体生成素（LH）高峰，GnＲH分泌的增加和GnＲHＲ数量的增加均会引起LH高峰。因此，GnＲH基因和GnＲHＲ基因在哺
许多乳动物的繁殖调控中起重要作用［4］。近年来，
研究人员将GnＲHＲ基因作为影响家畜繁殖性能的候选基因来研究，取得了一系列研究成果。吴旭等［5］检测文昌鸡的GnＲHＲ内含子1的多态性发现，其多态性与300和400日龄的产蛋数显著相关。孙
CnＲHＲ基因多态性与小尾寒羊的洁等［6］研究表明，
高繁殖力也存在相关性。韩丹等［7］在西农萨能奶山
羊和波尔山羊2个品种GnＲHＲ基因中发现2个多态收稿日期：2014－09－29；修回日期：2014－10－11
位点，并且这2个多态位点均与其产羔数显著相关。基金项目：贵州省科技重大专项项目（黔科合重大专项字
利用DNA池和测序技术筛选单核苷酸多态性（SNP）（2013）6008）
作者简介：张劲松（1973－），男，畜牧师，硕士，研究方向为畜具有方便快捷、切实有效等特点［8］。试验采用DNA牧水产技术推广．池结合PCＲ测序法对山羊GnＲHＲ基因全部外显子通信作者：陈祥（1974－），男，教授，博士，研究方向为动物
进行多态位点检测，并进行生物信息学分析，以期筛
遗传育种与繁殖，as．xchen@gzu．edu．cn．
选出对山羊繁殖性状有益的多态位点，为提高贵州地
［16］朱淑斌，赵旭庭，周春宝，等．姜曲海猪A－FABP基因内含子1
多态性与肉质性状的相关分析［J］．中国畜牧杂志，2013，49（13）：12－15．
位点多态性研究［J］．畜牧与兽医，2010，42（8）：15－18．
苏玉虹，宋衡元．辽宁种猪H－FABP和A－FABP基因［14］朱弘焱，
［15］刘志成，强巴央宗，张浩，等．藏猪FABPs基因PCＲ－ＲFLP多样
性研究［J］．中国农业大学学报，2009，14（6）：6－10．
（015）
98
方山羊繁殖性能提供分子生物学依据。1材料
1．1山羊血样采集和DNA池构建
贵州黑山羊（103只），采自贵州省赫章县；贵州白山羊（105只），采自贵州省沿河县；黔北麻羊（105只），采自贵州省习水县。样品均来自各个品种的中心产区。试验采用颈静脉采血，ACD抗凝，样品均于－20℃冰箱保存，用于提取DNA。参照全血基因组提取试剂盒使用说明书，从血液中提取基因组DNA，1%琼脂糖凝胶电泳检测DNA提取效果，并用紫外分光光度计测定DNA样品浓度，置于－20℃条件下保存，备用。分别调整3种山羊DNA样品浓度至100ng/μL，各取5μL混合构建各自品种的DNA池。
1．2试验试剂
血液基因组DNA提取试剂盒、Mixture、DL－2000Marker、核酸染料等，均购自鼎国生物工程技术有限公司；TAE缓冲液、超纯水、无水乙醇等，由高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室制备。2方法
2．1引物设计及DNA扩增
以绵羊GnＲHＲ基因DNA全序列（GenBank登录号为NC_019460．1）设计引物，利用NCBI在线软件Primer－BLAST设计3对特异性引物。引物P1扩增片段包含GnＲHＲ基因第1外显子序列及第1内含子部分序列，引物P2扩增片段包含GnＲHＲ基因第2外显子序列及第2内含子部分序列，引物P3扩增片段扩增外显子3序列。引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。引物信息，见表1。
表1
引物P1P2P3
退火温度/℃635859
退火温度及目的片段长度引物序列、目的片段长度/bp9214341121
引物序列
F5'－AAACCAGGCCATCTGCTGAG－3'Ｒ5'－CTGACTTCCAGAGCCCAAGC－3'F5'－AGCAGTTGCTTTGGGCAACA－3'Ｒ5'－CACAGCAAGTGCCATTCTGAT－3'F5'－AGTTCAACCTCAGTCCACTCT－3'Ｒ5'－TGGATAGTGGGTTGGTTGCT－3'
扩增区域外显子1及内含子1外显子2及内含子2外显子3
HeilongjiangAnimalScience
andVeterinaryMedicine
№082015
诺赛基因组研究中心有限公司进行测序。2．3序列分析、比对及等位基因频率估算
将测得的序列用DNAStar软件中SeqMan程序对序列进行组装校对，BLAST分析并确定SNP。利用测序图看图软件Chromas．exe和MWSnap测量各SNP位点等位基因的相应峰高。SNP通常所指二等位多态性，并根据以下公式估算等位基因频率［9］。
i=1，2。式中：fi表示SNP位点某fi=hi/（h1+h2），
等位基因频率，h1和h2分别表示测序图上该SNP等位基因1，2峰高度。
2．4GnＲHＲＲNA二级结构预测
利用在线软件对GnＲHＲ基因突变前后不同DNA序列进行ＲNA二级结构变化预测，比对结果并分析。ＲNA二级结构在线预测软件：http：//
3．1DNA池的PCＲ扩增产物检测（结果见图1
）
M．DL－2000Marker；1．贵州白山羊；2．黔北麻羊；
3．贵州黑山羊。
图1PCＲ扩增产物检测结果
PCＲ反应体系及条件
反应体系（10μL）：构建DNA池进行PCＲ反应，
基因组DNA1μL，10pmol/μL上、下游引物各0．75μL，2×TaqPCＲMasterMix试剂5μL，双蒸水2．5μL。PCＲ扩增条件：95℃预变性3min；95℃变性30s，退火30s（退火温度见表1），72℃延伸1min，共34个循环；72℃再延伸5min；4℃保存。PCＲ产物用1%琼脂糖凝胶电泳检测，采用凝胶成像仪观察电泳结果。选择特异性好的PCＲ产物送北京
2．2
由图1可知，3对引物的PCＲ扩增条带整齐无拖带，引物特异性较好，与预期结果一致。PCＲ产物可直接用于测序试验。3．2PCＲ产物序列分析
试验设计3对引物分别扩增贵州白山羊、贵州黑山羊和黔北麻羊GnＲHＲ基因3个外显子及第1和第2内含子序列（见297页彩图2）。PCＲ产物经双向测序结果与绵羊GnＲHＲDNA序列（GenBank登录号为NC_019460．1）基本吻合，可以确定为山羊的GnＲHＲ基因序列。试验中SNP的位置均以其所在区域的外显子或内含子第1个碱基为第1位计算，则SNP位点分别为G121A、G15A，其中G121A位于外显子1中且为同义突变，G15A位于第2内含子区。3．3SNP等位基因频率估算
利用MWSnap软件中的标尺分别测量3个山羊品种中2个等位基因相应的峰高，并根据等位基因频率公式估算各位点等位基因频率（见表2），外显子区G121A和内含子区G15A位点在3个山羊品种的优势等位基因均为G。
3．4GnＲHＲ的ＲNA二级结构预测
表2多态位点G121AG15A
3个山羊品种SNP等位基因频率估算结果所在位置第1外显子第2内含子
贵州白山羊G（0．61）A（0．39）G（0．81）A（0．19）
黔北麻羊G（0．63）A（0．37）G（0．83）A（0．13）
贵州黑山羊G（0．80）A（0．20）G（0．76）A（0．24）
结构明显变化，自由能增加了5．03kJ/mol，结构稳定
性减弱。本研究结果可为进一步探讨GnＲHＲ基因的相关功能提供参考，同时下一步工作将扩大山羊品种与数量，分析上述多态性位点与山羊繁殖性状的关联性，探究GnＲHＲ基因对地方山羊繁殖性能的调控作用，从而为贵州地方山羊的选育工作奠定基础。参考文献：
［1］NOＲWITZEＲ，JEONGKH，CHINWW．Molecularmecha-nismsofgonadotropin－releasinghormonereceptorgeneregulation［J］．JSocGynecolInvestig，1999，6（4）：169－178．
［2］MONTGOMEＲYGW，PENTYJM，LOＲDEA，etal．Thegona-dotrophin－releasinghormonereceptormapstosheepchromosome6outsideoftheregionoftheFecBlocus［J］．MammGenome，1995，6（6）：436－438．
［3］HAPGOODJP，SADIEH，VanBILJONW，etal．Ｒegulationofex-pressionofmammaliangonadotrophin－releasinghormonereceptorgenes［J］．JNeuroendocrinol，2005，17：619－638．
［4］刘忠慧，储明星，陈国宏．促性腺激素释放激素基因及其受体基
因的研究进展［J］．中国畜牧兽医，2006，33（3）：35－39．［5］吴旭，王金玉，严美姣，等．GNＲHＲ，IGF－1基因对文昌鸡繁殖
性状的遗传效应分析［J］．畜牧兽医学报，2007，38（1）：31－35．［6］孙洁，储明星，陈宏权，等．GnＲHＲ基因多态性及其与小尾寒羊
高繁殖力关系［J］．农业生物技术学报，2008，16（2）：230－236．［7］韩丹，李广，曹斌云，等．促性腺激素释放激素受体基因（Gn-ＲHＲ）多态性及其与西农萨能奶山羊产羔性状关系的研究［J］．中国农业大学学报，2009，14（5）：93－97．
［8］崔建勋，杜红丽，张细权．利用DNA池和测序技术快速筛查
SNPs及估算基因频率［J］．遗传学报，2005，32（4）：372－377．［9］SULIMANHB，CAＲＲAWAYMS，PIANTADOSICA．Postlipopo-lysaccharideoxidativedamageofmitochondrialDNA［J］．AmJＲe-spirCritCareMed，2003，167（4）：570－579．
［10］FANNC，PENGC，KＲISINGEＲPC，etal．Thehumangonadottopin－
releasinghormonereceptorgene－completestructureincludingmul-tiplepromoers，transcriptioninitationsitesandpolyadenylationsig-nals［J］．MolCellEndocrinol，1995，107（2）：Ｒ1－Ｒ8．
［11］deＲOUXN，YOUNGJ，MISＲAHIM，etal．Afamilywithhypogo-nadotropichypogonadismandmutationsinthegonadotropin－relea-singhormonereceptor［J］．NEnglMed，1997，337（22）：1597－1603．
［12］JIANGZ，GIBSONJP，AＲCHIBALDAL，etal．Theporcinegona-dotropin－releasinghormonereceptorgene（GNＲHＲ）：genomicor-ganization，polymorphisms，andassociationwiththenumberofcor-poralutea［J］．Genome，2001，44（1）：7－12．
［13］彭亮．番鸭GnＲHＲ基因全长cDNA克隆、时空表达及对产蛋性
能的关联研究［D］．福州：福建农林大学，2013．
［14］黄杨河，王凭青，杨力，等．促性腺激素释放激素受体（GnＲHＲ）
基因多态性及其与山羊产羔数的相关性分析［J］．畜牧兽医学报，2012，43（1）：22－28．
将山羊GnＲHＲ基因第1外显子处1个SNP突
变前后不同DNA序列利用在线软件进行ＲNA二级结构变化预测，结果见297页彩图3。
由297页彩图3可知，外显子1中的SNP导致mＲNA二级结构的改变。当外显子1－G121A位点为G时，其mＲNA二级结构自由能减小，结构稳定性增强；当外显子1－G121A位点为A时，其mＲNA二级结构自由能增加，结构稳定性减弱。4讨论
国内外学者研究发现，GnＲHＲ基因存在多个潜在启动子和转录起始位点，机体可根据不同条件选择性启用转录位点，形成不同变异型的GnＲHＲ，参与不同的生理效应［10］。对GnＲHＲ基因与繁殖性能的关系展开大量研究，证实两者确实密切相关。关于Gn-ＲHＲ基因多态性的报道经常出现：N．deＲoux等［11］
人的GnＲHＲ基因有G317A和A785G两研究发现，
处突变；有人在梅山×欧洲大白猪的杂交二代中发现在3'－UTＲ有C1721G突变［12］；彭亮［13］经过PCＲ－SSCP和PCＲ－ＲFLP技术检测番鸭的GnＲHＲ基因，在内含子2上存在一处C→T碱基突变；黄杨河等［14］检测10个山羊品种GnＲHＲ基因第1，2，3外显子的多态性，只在第1外显子发现1个G154A突变，该突变为沉默突变。研究检测了贵州白山羊、贵州黑山羊和黔北麻羊3个贵州地方品种GnＲHＲ基因第1，2，3外显子和部分内含子的多态性，在第1外显子和第2内含子中分别发现1个突变，即G121A、G15A。外显
［14］
该突变为子突变位点与黄杨河等试验结果一致，
沉默突变。
随着分子生物学的迅猛发展，近年来对分子的研究已逐渐转移到蛋白质结构上，而生物信息学作为一门对基因和蛋白质的相关研究有着重要辅助作用的新学科必将在今后的相关研究中越来越受到重视。研究在关中奶山羊GnＲHＲ基因外显子1中发现1个SNP位点，即G121A，并进行生物信息学分析，利用NCBI上SequenceAnalysis工具和在线软件ＲNAsec-ondarystructureprediction进行预测，外显子1处G121A为脯氨酸的同义突变，突变导致mＲNA二级
（015）
·遗传育种与繁殖·
贵州地方山羊GnＲHＲ基因多态性研究
（作者张劲松等，正文见第97～99页）
图23个山羊品种GnＲHＲ基因PCＲ产物测序及BLAST分析结果
图3GnＲHＲ基因SNP位点突变前后ＲNA二级结构变化
檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯檯·营养与饲养管理·
B超活体测定牦牛眼肌面积和背膘厚的研究
（作者郭
宪等，正文见第109～111
页）
图1
成年牦牛背膘厚图2青年（1岁）牦牛背膘厚
上一篇：尼古拉大火鸡,,,哪有卖的
下一篇：桃甜度20